[发明专利]一种与甲状腺乳头状癌辅助诊断相关的循环miRNA标志物及其应用

说明书

本发明公开一种与甲状腺乳头状癌辅助诊断相关的循环miRNA标志物及其应用，该标志物为血浆标志物miR‑346,miR‑10a‑5p和miR‑34a‑5p以及血清标志物miR‑25‑3p,miR‑296‑5p和miR‑92a‑3p中的一种或多种。循环miRNA作为新型的生物标志物，具有稳定性好、微创易获取、灵敏性和特异性高的特点。这类分子标志物的开发利用将为包括肿瘤在内的各种疾病的诊断以及进一步治疗提供新的方向。本研究将更有针对性的得出具有临床诊断潜能的甲状腺乳头状癌循环miRNA标记物。研究证实了这组miRNA作为诊断甲状腺乳头状癌的无创标记物的可靠性以及可重复性。

技术领域

本发明属于基因工程及肿瘤学领域，涉及一种与甲状腺乳头状癌辅助诊断相关的循环miRNA标志物及其应用。

背景技术

甲状腺癌(Thyroid Cancer)起源于甲状腺组织，是内分泌系统中最常见的恶性肿瘤之一，近30年来全球发病率增长近三倍。其中，甲状腺乳头状癌(Papillary ThyroidCarcinoma，PTC)是最常见的亚型，约占甲状腺癌的80-85％。外科治疗目前是甲状腺乳头状癌首选和最主要的治疗方法，并且能对早期的甲状腺乳头状癌患者达到治愈的目的，但由于甲状腺乳头状癌患者早期临床表现无明显特异性，在我国早期诊断率仍较低，易错失最佳的手术治疗时机。目前，超声波(ultrasound imaging)及细针抽吸细胞检查(Fine-Needle Aspiration biopsy，FNA)是较为推荐的诊断方法，但其仍存在诸如成本高、耗时长、损伤大以及过于依赖仪器设备和研究人员专业水平等方面的局限性。随着基因组学、蛋白组学以及代谢组学等生物技术的发展，越来越多的生物标志物已被发现或研究。因此，发现新的能够早期诊断甲状腺乳头状癌的标记物指日可待，从而促进甲状腺乳头状癌早期干预和治疗，延长病人的生存期。

微小RNA(miRNAs)是一类长度在22个左右的核苷酸的小非编码RNA分子，其通过转录后调控广泛参与了各种生命活动过程，包括肿瘤的发生、侵袭及转移等。研究发现，miRNA的表达在肿瘤中有不同程度的上调和下调，为其能够作为一种新兴的肿瘤标志物奠定了基础。2008年，Mitchell在外周血中检测到游离的miRNA，发现其能够稳定存在于外周血中，并且可以作为诊断肿瘤的无创标志物。现已有研究证实了循环miRNA在甲状腺癌、胃癌、肺癌、乳腺癌、结直肠癌等肿瘤中的潜在诊断价值。但由于研究方法及纳入人群的差异，导致研究结果不完全一致。因此，本研究利用Exiqon miRNA qPCR panel芯片以及基于qRT-PCR的相对定量法，通过对大样本的甲状腺乳头状癌血清及血浆的研究，旨在寻找对甲状腺乳头状癌具有潜在诊断价值的循环miRNA。并对这些miRNA在甲状腺乳头状癌组织中以及外周血外泌体中的表达进行验证，以进一步明确其与甲状腺乳头状癌的关系。若根据这类miRNA设计针对于甲状腺乳头状癌的诊断试剂盒，将会推动我国甲状腺乳头状癌的诊治水平，也为将来对甲状腺乳头状癌的进一步研究提供思路。

发明内容

本发明的目的在于提供一种与甲状腺乳头状癌辅助诊断相关的循环miRNA标志物。

本发明的另一目的在于提供上述循环miRNA标志物及其引物在制备甲状腺乳头状癌辅助诊断试剂盒以及在制备治疗甲状腺乳头状癌的药物中的应用。

本发明的又一目的在于提供用于甲状腺乳头状癌辅助诊断和治疗的试剂盒及药物。

本发明的目的可以通过以下技术方案实现：

一种与甲状腺乳头状癌辅助诊断相关的循环miRNA标志物，该标志物为血浆标志物miR-346(ugucugcccgcaugccugccucu),miR-10a-5p(uacccuguagauccgaauuugug)和miR-34a-5p