[发明专利]一种具有阴离子转运活性的通道蛋白及其基因组修饰调控作物籽粒大小有效
| 申请号： | 201810880297.3 | 申请日： | 2018-08-03 |
| 公开（公告）号： | CN109082438B | 公开（公告）日： | 2021-03-30 |
| 发明（设计）人： | 李乐攻;任志杰;李嘉熙 | 申请（专利权）人： | 首都师范大学 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;C12N15/29;C12N15/113;C12N5/10;C07K14/415;A01H5/10;A01H6/46 |
| 代理公司： | 北京天驰君泰律师事务所 11592 | 代理人： | 孟锐 |
| 地址： | 100048 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 具有 阴离子 转运 活性 通道 蛋白 及其 基因组 修饰 调控 作物 籽粒 大小 | ||
1.一种调整水稻籽粒大小的方法，包括：
通过基因工程技术手段改造水稻的DNA片段，使得水稻中TCBG1基因敲除、敲低或基因沉默；其中TCBG1基因的CDS序列如SEQ ID NO.1所示，氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述基因工程技术手段为CRISPR/Cas9。
3.根据权利要求2所述的方法，其中，CRISPR/Cas9靶序列为如下所述的一个或多个：
CGCCGTCGCCGCCGCACGAGAGG；
CCTCGGCCGCCTCGGCGACCTCC；
CCGCCATGGACCCCATCTGCGGG；
CCCAGCTGCCTCAACACCTGCC；
GCGGGCATGGTGTCGATCGTGGG；
CAAGGCCAGACTTGGGATCCAGG。
4.根据权利要求3所述的方法，其中，通过CRISPR/Cas9获得的重组DNA片段的CDS序列如SEQ ID NO.3所示，氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。
5.根据权利要求1所述的方法，其中所述基因工程手段为TALEN技术。
6.根据权利要求5所述的方法，其中TALEN识别区序列为如下所述的一个或多个：
GGCCGTCACCACCGCCTTCCTCGGCCGCCTCGGCGACCTCCAGCTCGCCGCCGGC；
CGCCGTCCTCACCGGCCTCTGCGCCGCCATGGACCCCATCTGCGGGCAGGCGC；
CGCCTCCGCCCTGGCCCTGGCGCTCCACGTCCCCCTCACCATGTGGATGGCCAGG。
7.根据权利要求1所述的方法，其中，所述基因工程技术手段为RNAi。
8.根据权利要求7所述的方法，其中，RNAi靶序列如SEQ ID NO.5所示。
9.一种通过基因工程技术手段改造水稻的DNA片段在调整水稻籽粒大小方面的应用；其中，所述通过基因工程技术手段改造水稻的DNA片段使得水稻中TCBG1基因敲除、敲低或基因沉默，TCBG1基因的CDS序列如SEQ ID NO.1所示，氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
10.根据权利要求9所述的应用，其中，所述基因工程技术手段为CRISPR/Cas9。
11.根据权利要求10所述的应用，其中，CRISPR/Cas9靶序列为如下所述的一个或多个：
CGCCGTCGCCGCCGCACGAGAGG；
CCTCGGCCGCCTCGGCGACCTCC；
CCGCCATGGACCCCATCTGCGGG；
CCCAGCTGCCTCAACACCTGCC；
GCGGGCATGGTGTCGATCGTGGG；
CAAGGCCAGACTTGGGATCCAGG。
12.根据权利要求10所述的应用，其中，通过CRISPR/Cas9获得的重组DNA片段的CDS序列如SEQ ID NO.3所示，氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。
13.根据权利要求9所述的应用，其中所述基因工程手段为TALEN技术。
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