[发明专利]多阶段转速调控策略提高脱氮假单胞杆菌发酵生产维生素B12在审
| 申请号： | 201810880607.1 | 申请日： | 2018-08-04 |
| 公开（公告）号： | CN108949866A | 公开（公告）日： | 2018-12-07 |
| 发明（设计）人： | 胡勇干;王鑫;刘延茂;李会 | 申请（专利权）人： | 广济药业（孟州）有限公司 |
| 主分类号： | C12P19/42 | 分类号： | C12P19/42;C12R1/38 |
| 代理公司： | 焦作市科彤知识产权代理事务所(普通合伙) 41133 | 代理人： | 聂智良 |
| 地址： | 454750 河南省焦*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 搅拌转速 发酵 维生素 发酵培养基 假单胞杆菌 脱氮 转速调控 多阶段 生长素 生物发酵技术 发酵培养 分离纯化 谷氨酰胺 蔗糖 发酵液 色氨酸 甜菜碱 玉米浆 菌株 生产 | ||
1.多阶段转速调控策略提高脱氮假单胞杆菌发酵生产维生素B12，其特征在于，包括以下步骤：
1）将脱氮假单胞杆菌菌株在发酵培养基中发酵培养，生产维生素B12，采用的发酵培养基中含有：蔗糖70～85g/L、玉米浆40～55g/L、甜菜碱10～20g/L、硫酸铵0.5～1.5g/L、磷酸二氢钾0.5～1g/L、氯化钴0.05～0.1g/L、氧化镁0.4～0.6g/L、5,6～二甲基苯并咪唑0.04～0.06g/L、硫酸锌0.05～0.1g/L、碳酸钙0.8～1.2g/L、生长素0.02～0.05g/L、色氨酸0.01～0.05g/L和谷氨酰胺0.05～0.1g/L，发酵培养基的pH为7.2-7.4；发酵过程中，对搅拌转速进行分阶段控制，发酵的0-25h，搅拌转速为150-280rpm，发酵的26-90h，搅拌转速为300-400rpm，发酵的91-185h，搅拌转速为100-200rpm；
2）从步骤1）得到的发酵液中分离纯化出维生素B12。
2.根据权利要求1所述的多阶段转速调控策略提高脱氮假单胞杆菌发酵生产维生素B12，其特征在于：所述发酵培养基中含有：蔗糖75～85g/L、玉米浆40～50g/L、甜菜碱12～18g/L、硫酸铵0.8～1.2g/L、磷酸二氢钾0.5～0.8g/L、氯化钴0.05～0.08g/L、氧化镁0.4～0.6g/L、5,6～二甲基苯并咪唑0.04～0.06g/L、硫酸锌0.05～0.08g/L、碳酸钙0.8～1.0g/L、生长素0.02～0.05g/L、色氨酸0.02～0.05g/L和谷氨酰胺0.06～0.1g/L，发酵培养基的pH为7.2-7.4。
3.根据权利要求1所述的多阶段转速调控策略提高脱氮假单胞杆菌发酵生产维生素B12，其特征在于：发酵的0-25h，搅拌转速为150-220rpm，发酵的26-90h，搅拌转速为300-400rpm，发酵的91-185h，搅拌转速为100-150rpm。
4.根据权利要求3所述的多阶段转速调控策略提高脱氮假单胞杆菌发酵生产维生素B12，其特征在于：发酵的0-25h，搅拌转速为150-180rpm，发酵的26-90h，搅拌转速为350-380rpm，发酵的91-185h，搅拌转速为100-120rpm。
5.根据权利要求1所述的多阶段转速调控策略提高脱氮假单胞杆菌发酵生产维生素B12，其特征在于，发酵条件包括：发酵温度为30-33℃，通气速率为0.8-1.2LPM，pH值为7-7.2。
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