[发明专利]一种虾血细胞虹彩病毒抗原抗体检测试剂盒

权利要求书

1.一种虾血细胞虹彩病毒抗原抗体检测试剂盒，其特征在于：包括虾血细胞虹彩病毒抗原检测试纸卡和/或虾血细胞虹彩病毒抗体检测试纸卡和层析稀释液，其中，虾血细胞虹彩病毒抗原检测试纸卡包含虾血细胞虹彩病毒抗原胶体金层析检测试剂，虾血细胞虹彩病毒抗体检测试纸卡包含虾血细胞虹彩病毒抗体胶体金层析检测试剂，所述层析稀释液由终浓度1％casein，0.4％Tween-20和10mMPBS缓冲系统组成，其中，

所述虾血细胞虹彩病毒抗原检测试纸卡是由下述方法得到的：

病毒亲和纯化抗体的标记：选择胶体金用0.2M K₂CO₃调节其pH值，加入虾血细胞虹彩病毒亲和纯化抗体，室温标记和封闭，离心后用复溶液悬浮；

鸡IgY的标记：选择胶体金用0.2M K₂CO₃调节其pH值，用鸡IgY室温标记，标记后室温封闭，离心后用复溶液悬浮；

免疫金的制备：将病毒亲和纯化抗体免疫金和鸡IgY免疫金混合铺金，过夜烘干；

包被：

C线：在NC膜上包被抗鸡IgY多抗，加入保护剂做保护；

T线：在NC膜上包被重组抗原亲和纯化抗体，加入保护剂做保护；

所述虾血细胞虹彩病毒抗体检测试纸卡是由下述方法得到的：

病毒抗原的标记：选择胶体金用0.2M K₂CO₃调节其pH值，加入虾血细胞虹彩病毒抗原，室温标记和封闭，离心后用复溶液将沉淀复溶；

鸡IgY的标记：选择胶体金用0.2M K₂CO₃调节其pH值，用鸡IgY室温标记，标记后室温封闭，离心后用复溶液悬浮；

免疫金的制备：将病毒抗原免疫金和鸡IgY免疫金混合铺金，过夜烘干；

包被：

C线：在NC膜上包被抗鸡IgY多抗，并加入抗体保护剂保护；

G线：在NC膜上包被抗人IgG单抗，并加入保护剂进行保护；

M线：在NC膜上包被抗人IgM单抗，并加入保护剂进行保护。

2.根据权利要求1所述的虾血细胞虹彩病毒抗原抗体检测试剂盒，其特征在于：虾血细胞虹彩病毒抗原检测试剂盒包含30μl滴管，虾血细胞虹彩病毒抗原检测试纸卡，层析稀释液及虾血细胞虹彩病毒抗原检测试剂盒说明书，其虾血细胞虹彩病毒抗体检测试剂盒包含5μl直吸管，虾血细胞虹彩病毒抗体检测试纸卡，层析稀释液及虾血细胞虹彩病毒抗体检测试剂盒说明书；或者为抗原抗体二合一检测试剂盒，即包括30μl滴管+5μl直吸管，虾血细胞虹彩病毒抗原检测试纸卡+虾血细胞虹彩病毒抗体检测试纸卡，层析稀释液及虾血细胞虹彩病毒抗原抗体检测试剂盒说明书。

3.根据权利要求1所述的虾血细胞虹彩病毒抗原抗体检测试剂盒的制备方法，其特征在于：步骤如下：

(1)通过分子克隆、蛋白表达好验证以及蛋白纯化的方式获得NP蛋白；

(2)SFTSV病毒免疫豚鼠，制得的多抗血清经过NP蛋白亲和纯化得到抗SFTSV NP豚鼠多抗；

(3)NP蛋白免疫豚鼠获得NP蛋白多抗血清后与NP蛋白亲和纯化抗NP蛋白多抗；

(4)利用步骤(2)中产物进行虾血细胞虹彩病毒抗原诊断免疫金的制备；利用步骤(3)中产物进行虾血细胞虹彩病毒抗原诊断包被膜的制备；利用步骤(1)中产物进行虾血细胞虹彩病毒抗体检测免疫金的制备。