[发明专利]信号肽相关序列及其在蛋白质合成中的应用

权利要求书

1.一种核酸构建物，该核酸构建物包含编码信号肽的第一核苷酸序列，其与编码外源蛋白的第二核苷酸序列可操作地连接，第一核苷酸序列的3′端在第二核苷酸序列的上游，且第一核苷酸序列选自下组：

(a)编码以下任一信号肽的核苷酸序列：氨基酸序列为SEQ ID NO.：14-24的信号肽；

(b)SEQ ID NO.：1-13所示的任一核苷酸序列。

2.根据权利要求1所述的核酸构建物，其特征在于：所述的可操作地连接为直接连接或通过连接序列连接。

3.根据权利要求2所述的核酸构建物，其特征在于：所述的连接序列为SEQ ID NO.：25所示的核苷酸序列。

4.一种信号肽，其特征在于：其氨基酸序列由权利要求1中的第一核苷酸序列编码产生。

5.一种载体或载体组合，其特征在于，所述的载体或载体组合含有权利要求1-3任一所述的核酸构建物。

6.一种基因工程细胞，其特征在于，所述基因工程细胞的基因组的一个或多个位点整合有权利要求1-3任一所述的核酸构建物，或者所述基因工程细胞中含有权利要求5所述的载体或载体组合。

7.一种试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中包含的试剂选自下组中的一种或多种：

(a)权利要求1-3任一所述的核酸构建物；

(b)权利要求5所述的载体或载体组合；和

(c)权利要求6所述的基因工程细胞。

8.根据权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，其还包括(d)体外生物合成体系。

9.根据权利要求8所述的试剂盒，其特征在于：所述体外生物合成体系选自下组：酵母体外生物合成体系、中国仓鼠卵巢细胞体外生物合成体系、昆虫细胞体外生物合成体系、Hela细胞体外生物合成体系、或其组合。

10.根据权利要求9所述的试剂盒，其特征在于：所述的酵母体外生物合成体系为克鲁维酵母体外生物合成体系。

11.一种如权利要求1-3任一所述的核酸构建物、权利要求4所述的信号肽、权利要求5所述的载体或载体组合、权利要求6所述的基因工程细胞或权利要求7-9任一所述试剂盒在体外蛋白合成体系中的应用。

12.一种体外蛋白合成方法，其特征在于，其包括以下步骤：

(i)提供一体外生物合成体系，所述体外生物合成体系含有权利要求1-3任一所述的核酸构建物；

(ii)在适合的条件下，孵育步骤(i)的体外生物合成体系一段反应时间，从而合成所述外源蛋白。

13.根据权利要求12所述的体外蛋白合成方法，其特征在于，合适的条件为反应温度为20-37℃，反应时间为1-72h。

14.根据权利要求12所述的体外蛋白合成方法，其特征在于，所述方法还包括：(iii)分离或检测所述外源蛋白。