[发明专利]主动脉基因突变检测用引物探针、试剂盒及方法

说明书

本发明涉及生物技术领域，本发明公开了一种主动脉基因突变检测用引物探针、试剂盒及方法，所述的引物探针的序列包括：野生探针P+1序列如SEQ ID NO.1所示；突变探针P‑1序列如SEQ ID NO.2所示；上游引物F1序列如SEQ ID NO.3所示；下游引物R1序列如SEQ ID NO.4所示；或包括：野生探针P+2序列如SEQ ID NO.5所示；突变探针P‑2序列如SEQ ID NO.6所示；上游引物F2序列如SEQ ID NO.7所示；下游引物R2序列如SEQ ID NO.8所示；或包括：野生探针P+3序列如SEQ ID NO.9所示；突变探针P‑3序列如SEQ ID NO.10所示；上游引物F3序列如SEQ ID NO.11所示；下游引物R1序列如SEQ ID NO.12所示。本发明的引物探针可以精准地检测主动脉基因位点的突变。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种主动脉基因突变检测用引物探针、试剂盒及方法。

背景技术

本发明对于背景技术的描述属于与本发明相关的相关技术，仅仅是用于说明和便于理解本发明的内容，不应理解为申请人明确认为或推定申请人认为是本发明在首次提出申请的申请日的现有技术。

主动脉疾病主要包括主动脉瘤及急性主动脉综合征(Acute Aortic Syndrome，AAS)。主动脉瘤是指主动脉病理性的扩张，超过正常血管直径的50％。急性主动脉综合征包括主动脉壁内血肿(intramural hemorrhage and hematoma，IMH)、主动脉夹层(aorticdissection，AD)及主动脉穿透性溃疡(penetrating ulcer，PAU)。三者临床表现均为胸痛等症状，均以动脉中层破坏为特征。

主动脉疾病的发病机理尚不清楚，近年来，分子生物学技术有了长足的发展，人们开始从基因及蛋白质水平探索主动脉壁疾病的病因，然而对于主动脉基因突变的检测尚无有效的手段。

发明内容

本发明的实施例的目的是提供一种主动脉基因突变检测用引物探针、试剂盒及制备方法，本发明的引物探针和试剂盒可以有效检测主动脉基因突变。

本发明的目的是通过如下技术方案实现的：

第一方面，本发明实施例提供了一种主动脉基因突变检测用引物探针，所述的引物探针的序列包括：

野生探针P+1序列如SEQ ID NO.1所示；突变探针P-1序列如SEQ ID NO.2所示；上游引物F1序列如SEQ ID NO.3所示；下游引物R1序列如SEQ ID NO.4所示；

或包括：

野生探针P+2序列如SEQ ID NO.5所示；突变探针P-2序列如SEQ ID NO.6所示；上游引物F2序列如SEQ ID NO.7所示；下游引物R2序列如SEQ ID NO.8所示；

或包括：

野生探针P+3序列如SEQ ID NO.9所示；突变探针P-3序列如SEQ ID NO.10所示；上游引物F3序列如SEQ ID NO.11所示；下游引物R1序列如SEQ ID NO.12所示。

第二方面，本发明实施例提供一种主动脉基因突变检测用引物探针的筛选方法，包括如下步骤：

(1)配反应液：所述的反应液包括：所述的野生探针为权利要求1所述的野生探针P+1，P+2或P+3；所述的突变探针为权利要求1所述的突变探针P-1，P-2或P-3；所述的上游引物为权利要求1所述的上游引物F1，F2或F3；所述的下游引物为权利要求1所述的下游引物R1，R2或R3；

(2)分装，扩增；

(3)筛选：提取已经过测序确定野生和突变型的样本DNA用于探针引物筛选；得到权利要求1所述的引物探针。