[发明专利]一种可缓释生物活性因子的微孔隙脱细胞牛心包基质

说明书

本发明提供了一种可缓释生物活性因子的微孔隙脱细胞牛心包基质，具有这样的特征：可缓释生物活性因子的微孔隙脱细胞牛心包基质具有微孔结构以及附着在微孔结构表面的生物活性因子，微孔结构为海绵状，微孔结构的微孔的形状为圆形或椭圆形，可缓释生物活性因子的微孔隙脱细胞牛心包基质的微孔大小不一，最大直径可达50μm，其中，生物活性因子为具有生物活性的生长因子，可缓释生物活性因子的微孔隙脱细胞牛心包基质通过将牛心包在真空条件下置于非离子型去污剂缓冲液中进行多次冻融后再依次在非离子型去污剂缓冲液、无菌去离子水以及磷酸盐溶液中进行震荡清洗，最后浸没在生物活性因子琼脂糖材料中得到的。

技术领域

本发明涉及组织工程领域，具体涉及一种可缓释生物活性因子的微孔隙脱细胞牛心包基质。

背景技术

组织工程是将活细胞接种在组织基质上，制造出一种与受者组织相容性好，无免疫原性、不需抗凝、耐久性强的生物材料。其中，天然基质材料是组织工程研究的重要内容之一。理想的天然基质材料应具备以下优点：(1)良好的组织相容性，无生物毒性；(2)具有三维立体结构，材料需呈多孔海绵状，有利于细胞粘附浸润，以及营养物质的深入和代谢产物的排泄；(3)富含生物活性因子，为宿主细胞生长提供良好的微环境；(4)具有良好的机械性能，能抵抗体内血液等流体冲刷。

目前，组织工程基质材料主要分为人工高分子生物合成材料和天然基质材料两类。人工高分子生物合成材料组织相容性差、体内组织重塑不良，故限制了其广泛应用。而天然基质材料，例如牛心包因其来源广泛、具有良好的张力强度、易于塑形和缝合等优点，而广泛用于生物型人工心脏瓣膜、人工血管的制备以及各种组织器官缺损的修补材料。在当前的应用过程中，常用戊二醛对牛心包中的细胞和基质进行交联固定，以达到降低免疫原性、减轻异物反应、稳定胶原基质、增强抗酶解能力以及达到对材料进行消毒、保存的目的。尽管这种处理的牛心包在临床上已经获得很大成功，但戊二醛并不能完全封闭异种抗原，残留抗原所引起的免疫排斥反应以及戊二醛所致的钙化是导致构建组织器官失功、影响其临床使用寿命的主要原因之一。另外戊二醛具有生物毒性，导致宿主细胞不易生长，体内重塑性差。

因此，研发无免疫原性、组织相容性和力学性能优良，在结构上呈多孔海绵状、富含生物活性分子的牛心包基质材料对解决当前牛心包临床应用瓶颈至关重要。脱细胞是组织工程研究中降低移植组织免疫原性、保留移植物三维组织结构和生物力学性能的重要方法。其中，去污剂是最常用的脱细胞试剂，其可分为离子型和非离子型去污剂两种。虽然离子型去污剂能取得良好的脱细胞效果，但是残存毒性、易去除可溶性的生物活性因子、基质材料结构致密等导致细胞很难内生性生长，在宿主体内重塑效果不佳，这成为限制其处理临床组织标本的瓶颈。

发明内容

本发明是为了解决上述问题而进行的，目的在于提供一种可缓释生物活性因子的微孔隙脱细胞牛心包基质。

本发明提供了一种可缓释生物活性因子的微孔隙脱细胞牛心包基质，具有这样的特征：可缓释生物活性因子的微孔隙脱细胞牛心包基质具有微孔结构以及附着在微孔结构表面的生物活性因子，微孔结构为海绵状，微孔结构的微孔的形状为圆形或椭圆形，可缓释生物活性因子的微孔隙脱细胞牛心包基质的微孔大小不一，最大直径可达50μm，其中，生物活性因子为具有生物活性的生长因子，可缓释生物活性因子的微孔隙脱细胞牛心包基质通过将牛心包在真空条件下置于非离子型去污剂缓冲液中进行多次冻融后再依次在非离子型去污剂缓冲液、无菌去离子水以及磷酸盐溶液中进行震荡清洗，最后浸没在生物活性因子琼脂糖材料中得到的。

在本发明提供的可缓释生物活性因子的微孔隙脱细胞牛心包基质中，还可以具有这样的特征：其中，非离子型去污剂缓冲液包括：Tris缓冲液、非离子型去污剂以及脱氧胆酸钠，Tris缓冲液的物质的量浓度范围为8～12mmol/L，PH值为7.4～7.8，非离子型去污剂在Tris缓冲液的体积分数范围为0.8％～1.5％W/V，脱氧胆酸钠在Tris缓冲液的体积分数范围为0～0.8％W/V。