[发明专利]一种基于多孔碳酸钙的纳米免疫制剂的制备及应用有效
| 申请号： | 201810890136.2 | 申请日： | 2018-08-07 |
| 公开（公告）号： | CN110420335B | 公开（公告）日： | 2022-05-27 |
| 发明（设计）人： | 唐波;李艳华;李娜;潘伟 | 申请（专利权）人： | 山东师范大学 |
| 主分类号： | A61K47/69 | 分类号： | A61K47/69;A61K31/7105;A61K45/00;A61K33/10;A61P35/00;A61P37/04 |
| 代理公司： | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 | 代理人： | 王志坤 |
| 地址： | 250014 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 基于 多孔 碳酸钙 纳米 免疫 制剂 制备 应用 | ||
1.一种基于多孔碳酸钙的纳米免疫制剂，其特征在于，所述纳米免疫制剂的组成为多孔碳酸钙纳米颗粒、免疫阻断抑制剂IDOi、脂质体层及免疫调节核酸CpG ODNs修饰；
所述基于多孔碳酸钙的纳米免疫制剂的制备方法，步骤如下：
（1）将CaCl2·H2O和NH4HCO3同时置于真空干燥室中，将整个系统保持在真空环境中一段时间后，通过离心分离制得的碳酸钙纳米颗粒；将分离得到的碳酸钙纳米颗粒置于无水乙醇溶液中装载IDOi，得到CaCO3@IDOi；
（2）将步骤（1）中制得的CaCO3@IDOi乙醇溶液与DOPA混合，然后将DPPC，胆固醇和DSPE-PEG加入上述溶液中，将溶液中的有机溶剂旋干，将制得的纳米颗粒溶于水溶液中，加入PEI后搅拌以制备CaCO3@IDOi@PEG@PEI；将所述CaCO3@IDOi@PEG@PEI与CpG ODN在水溶液中搅拌，即得该纳米制剂；
步骤（1）中，所述CaCl2·H2O：NH4HCO3质量比为（0.5-2）：（3-5），CaCO3和IDOi的质量比例为（35-45）：（0.5-2.5）；
步骤（2）中CaCO3@IDOi：DOPA：DPPC：胆固醇：DSPE-PEG：PEI的质量比为（35-45）：（12-18）：（12-18）：（6-10）：（30-35）：（0.2-1）。
2.如权利要求1所述的纳米免疫制剂，其特征在于，所述免疫制剂以多孔碳酸钙纳米颗粒为载体，所述多孔碳酸钙颗粒的孔道内部装载免疫阻断抑制剂IDOi，被脂质体层包覆后，脂质体层表面修饰免疫调节核酸CpG ODNs。
3.如权利要求1所述的纳米免疫制剂，其特征在于，所述脂质体层由DPPC、胆固醇和DSPE-PEG组成。
4.一种基于多孔碳酸钙的纳米免疫制剂的制备方法，其特征在于，步骤如下：
（1）将CaCl2·H2O和NH4HCO3同时置于真空干燥室中，将整个系统保持在真空环境中一段时间后，通过离心分离制得的碳酸钙纳米颗粒；将分离得到的碳酸钙纳米颗粒置于无水乙醇溶液中装载IDOi，得到CaCO3@IDOi；
（2）将步骤（1）中制得的CaCO3@IDOi乙醇溶液与DOPA混合，然后将DPPC，胆固醇和DSPE-PEG加入上述溶液中，将溶液中的有机溶剂旋干，将制得的纳米颗粒溶于水溶液中，加入PEI后搅拌以制备CaCO3@IDOi@PEG@PEI；将所述CaCO3@IDOi@PEG@PEI与CpG ODN在水溶液中搅拌，即得该纳米制剂；
步骤（1）中，所述CaCl2·H2O：NH4HCO3质量比为（0.5-2）：（3-5），CaCO3和IDOi的质量比例为（35-45）：（0.5-2.5）；
步骤（2）中CaCO3@IDOi：DOPA：DPPC：胆固醇：DSPE-PEG：PEI的质量比为（35-45）：（12-18）：（12-18）：（6-10）：（30-35）：（0.2-1）。
5.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，步骤（1）的具体步骤如下：将CaCl2·H2O和NH4HCO3同时置于真空干燥室中，设置温度为25℃，将整个系统保持在真空环境中24h后，通过10000-15000rpm离心分离制得碳酸钙纳米颗粒。
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