[发明专利]甘露糖修饰的共载抗原和双免疫激动剂磷脂杂化聚合物囊泡及其制备方法与应用

说明书

本发明涉及一种甘露糖修饰的共载抗原和双免疫激动剂磷脂杂化聚合物囊泡及其制备方法与应用，该疫苗载体以两亲性三嵌段共聚物为材料，亲水内腔中载入OVA，IMQ载入疏水的膜层，DOTAP阳离子层嵌合MPLA，阳离子脂质外层吸附外层OVA；并引入具有活性基团的磷脂，将具有靶向作用的甘露糖配体通过共价键连接载聚合物囊泡表面PEG活性远端，集主动靶向肿瘤、共递送抗原和佐剂等功能于一体；具有粒径小、分散性好、抗原载药量高和良好生物相容性等特点，可促进抗原的摄取、DC的活化与成熟、抗原的交叉提呈、抗原的淋巴结迁移、淋巴细胞的活化、效应性T细胞的免疫反应、CD8⁺T和CD4⁺T细胞应答及记忆性T细胞免疫反应。

技术领域

本发明涉及生物医学工程技术领域，具体涉及一种甘露糖修饰的共载抗原和双免疫激动剂磷脂杂化聚合物囊泡及其制备方法与应用。

背景技术

恶性肿瘤目前严重威胁人类健康，总体治愈率低于20％。目前临床上针对肿瘤的治疗方法主要包括手术切除、化疗和放疗。这些治疗手段往往聚焦于肿瘤局部病灶，都存在局限性，手术切除对发生转移的肿瘤治疗无效；化疗和放疗毒副作用大，严重损伤病人的免疫系统。肿瘤的治疗经历了传统治疗到靶向治疗，再到最新的细胞免疫治疗。肿瘤的免疫治疗已经成为“第四大”被证明能显著提高临床治疗效果的肿瘤治疗方法，是未来3-5年疾病治疗领域的热点，也是目前全球研究的热点，肿瘤的免疫治疗将会颠覆肿瘤治疗格局。通过增强机体的免疫系统(体液免疫和细胞免疫)，改变肿瘤生长的微环境抑制肿瘤生长，从而控制和杀灭肿瘤。给转移性晚期肿瘤患者带来福音，并被认为是目前唯一可能彻底治愈癌症的治疗手段。目前肿瘤免疫治疗主要3个方面着手：①作用于DC细胞抗原提呈阶段的DC治疗性肿瘤疫苗；②作用于T细胞活化效应阶段的T细胞过继疗法；③作用于免疫检查点信号传导的免疫检查点抑制剂。其中，DC治疗性肿瘤疫苗发展火热，制备DC疫苗主要分为两种方法，一种方法是体内抗原靶向DC，将抗原和佐剂与细胞表面受体配基如甘露糖或趋化因子等制成疫苗直接靶向体内DC，从而增强DC摄取抗原的能力；另一种方法是让DC在体外荷载抗原和佐剂后回输到患者体内，产生保护性免疫反应，两种方法的最终目的都是活化抗原特异性CD4⁺和CD8⁺ T细胞，最大程度发挥抗肿瘤效应。后者已经在肿瘤免疫治疗的临床研究中取得突破性进展，成为肿瘤免疫治疗的研究热点。DC疫苗安全性高，能够有效激发抗肿瘤免疫反应而无严重的毒副作用。

研究表明，甘露糖受体(MR)属于DC细胞和巨噬细胞膜表面受体，是C2型动物凝集素超家族之一，可以识别末端为甘露糖、海藻糖和N-乙酰葡萄糖胺的糖链，介导有效的抗原识别与摄取。未成熟的DC细胞表面高表达MR，因此甘露糖修饰对DC细胞具有特异的靶向性，从而提高对DC细胞的摄取和提呈效率。