[发明专利]一种人绒毛膜促性腺激素检测试剂盒及其制备方法与使用方法

说明书

本发明公开了一种人绒毛膜促性腺激素检测试剂盒及其制备方法与使用方法；所述试剂盒包括校准品、质控品、抗试剂A、抗试剂B、磁微粒试剂和发光底物；校准品和质控品是采用含蛋白的缓冲液溶解Total‑βhCG抗原，并稀释至含新生牛血清的缓冲液中配制得到；抗试剂A是异硫氰酸荧光素标记的Total‑βhCG包被抗体，抗试剂B是碱性磷酸酶标记的Total‑βhCG标记抗体；磁微粒试剂是由异硫氰酸荧光素抗体与磁微粒偶联制得。本发明还涉及该试剂盒的制备方法以及应用该试剂盒定量检测人体血清中的人绒毛膜促性腺激素(Total‑βhCG)含量的方法。试剂盒性能可靠、灵敏度高、线性范围宽，可配合半自动、全自动仪器使用。

技术领域

本发明涉及体外检测技术领域，特别涉及一种人绒毛膜促性腺激素检测试剂盒及其制备方法与使用方法。

背景技术

人绒毛膜促性腺激素(Human Chorionic Gonadotropin，Total-βhCG)是由胎盘的滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，是由α和β二聚体的糖蛋白组成的。人绒毛膜促性腺激素具有FSH和LH的功能，维持月经黄体的寿命，使月经黄体增大成为妊娠黄体。促进雄激素芳香化转化为雌激素，同时刺激孕酮形成。抑制植物凝集素对淋巴细胞的刺激作用，人绒毛膜促性腺激素可吸附于滋养细胞表面，以免胚胎滋养层细胞被母体淋巴细胞攻击。类LH功能，在胎儿垂体分泌LH以前，刺激胎儿睾丸分泌睾酮促进男性性分化；还可促进性腺发育，对男性能刺激睾丸中间质细胞的活力，增加雄性激素(睾酮)的分泌。对垂体联合缺陷的男性患者的治疗有重要意义，不仅能促进性腺发育及雄性激素的分泌，还能促进第二性征发育。能与母体甲状腺细胞TSH受体结合，刺激甲状腺活性。

成熟女性因受精的卵子移动到子宫腔内着床后，形成胚胎，在发育成长为胎儿过程中，胎盘合体滋养层细胞产生大量的人绒毛膜促性腺激素(human chorionicgonadotropin，HCG)，可通过孕妇血液循环而排泄到尿中。当妊娠1～2.5周时，血清和尿中的HCG水平即可迅速升高，第8周孕期达到高峰，至孕期第4个月始降至中等水平，并一直维持到妊娠末期。

人绒毛膜促性腺激素在受精后就进入母血并快速增殖一直到孕期的第8周，然后缓慢降低浓度直到第18～20周，然后保持稳定。一般完整的人绒毛膜促性腺激素水平至少升高到2.5MoM才与唐氏综合症有关。而实际完整人绒毛膜促性腺激素水平在DS患者母血中平均水平只有1.3MoM，不能明显鉴别出DS患者。用于DS检查的人绒毛膜促性腺激素相关分子有游离b-hCG和高糖hCG(H-hCG)。

在国内，人绒毛膜促性腺激素(Total-βhCG)检测临床上主要以胶乳集抑制试验和血凝抑制试验；放射免疫试验(RIA)；酶联免疫吸附试验(ELISA)；单克隆抗体胶体金试验应用为主，国外进口试剂价格非常昂贵，给患者带来很大的经济负担，不利于在基层普及，且技术灵敏度较低、线性窄、特异性较差，也不利于高通量的全自动检测。因此，有待开发对人绒毛膜促性腺激素(Total-βhCG)检测灵敏度高与可靠性并能降低检测成本的检测技术。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种提高检测灵敏度及可靠性，并降低成本，延长有效期的人绒毛膜促性腺激素检测试剂盒及其制备方法与使用方法。

为了解决上述技术问题，本发明的技术方案为：

一种人绒毛膜促性腺激素检测试剂盒，所述检测试剂盒包括以下试剂组份：

校准品、质控品、抗试剂A、抗试剂B、磁微粒试剂和发光底物；

所述校准品和质控品为采用校准品缓冲液溶解Total-βhCG抗原定容至0.3-0.8mg/mL，待20-40min后使用校准品缓冲液稀释制得；所述校准品缓冲液包括以下成分：新生牛血清、占所述新生牛血清质量0.01％-0.05％的四环素和占所述新生牛血清质量0.1％-0.5％的硫酸新霉素，并通过0.22μm滤膜过滤处理后制得；