[发明专利]一种冷沉淀的制备方法及其在人凝血因子Ⅷ生产中的应用

权利要求书

1.一种冷沉淀的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)新鲜人血浆速冻：新鲜人血浆采集后经低温速冻工艺冻结成形，并贮于-20℃以下的冻库，保证血浆中各种蛋白成分的活性。

(2)冷冻人血浆原料运输：采用全自动温度控制冷冻运输车进行血浆运输，运输过程中每30分钟自动记录温度1次，运输到达后立即转入-20℃冷库贮存。

(3)冷冻人血浆原料融浆：取-20℃冷库贮存一年内的冷冻人血浆原料，经-5～-3℃预升温处理24～36h，并于0～4℃恒温融浆至完全融化。

(4)冷冻人血浆原料混合静置：温和搅拌下对完全融化的血浆进行混合，形成均一血浆原料，并于0～4℃恒温静置4～8h。

(5)血浆低温连续离心：血浆静置后于0～4℃恒温连续离心，制得冷沉淀。

2.根据权利要求1所述的冷沉淀制备方法，其特征在于所述步骤(1)中的低温速冻工艺为每袋600g新鲜血浆均采用速冻装置于30min内完全冻结至无流动性液体存在，所述速冻装置为-30℃吹风式连续速冻装置。

3.根据权利要求1所述的冷沉淀制备方法，其特征在于所述步骤(3)中的血浆原料预升温处理温度为-5～-3℃，预升温时间为24～36h；恒温融浆温度为0～4℃。

4.根据权利要求1所述的冷沉淀制备方法，其特征在于所述步骤(4)中的血浆原料恒温静置温度为0～4℃，静置时间4～8h。

5.根据权利要求1所述的冷沉淀制备方法，其特征在于所述步骤(5)中的离心操作采用低温连续离心机，离心机转速1500～2500rpm，离心处理量为400～600L/h。

6.一种根据权利要求1-5所述制备方法所制备的冷沉淀及其在人凝血因子Ⅷ生产中的应用。

7.根据权利要求6所述的在人凝血因子Ⅷ生产中的应用，其特征在于人凝血因子Ⅷ按如下方法生产：a)含肝素钠的生理盐水溶解冷沉淀，b)质量浓度3％的Al(OH)₃凝胶吸附杂质，c)离心分离，d)上清液过滤后进行S/D病毒灭活，e)离子交换层析，f)超滤、透析，g)配液、分装。

8.根据权利要求7所述的在人凝血因子Ⅷ生产中的应用，其特征在于所述步骤c)中的离心分离出液温度：10～25℃，离心机转速10000～12000rpm。

9.根据权利要求7所述的在人凝血因子Ⅷ生产中的应用，其特征在于所述人凝血因子Ⅷ生产全过程均未使用乙醇。