[发明专利]一种纳豆激酶提取液及其应用

权利要求书

1.一种纳豆激酶提取液在制备促进损伤皮肤修复的药物中的应用；

所述纳豆激酶提取液从枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）UJS-1发酵产物中提取得到，有效成分的分子量位于[10k，100k）区间内；枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）UJS-1，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.14434；

所述纳豆激酶提取液的制备方法，包括以下步骤：

（1）将枯草芽孢杆菌UJS-1接种到LB固体培养基上进行活化培养，得活化菌株；

（2）将步骤（1）所述活化菌株的单菌落置于种子培养液中进行种子培养，得种子菌液；所述种子培养液由以下质量浓度的组分组成：0.2~1.5%的葡萄糖，0.4~1.8%的蛋白胨，0.1~0.8%的NaC1，0.02~0.2%的酵母提取物和0.2~0.8%的牛肉膏，余量为水，pH值6.8~7.3；

（3）将步骤（2）得到的所述种子菌液接种到发酵培养基中进行发酵，得发酵液；所述发酵培养基由以下质量体积比的原料组成：赤豆粉2~8%，葡萄糖1~5%，NaCl 0.3~0.7%，K₂HPO₄0.05~0.2%，KH₂PO₄ 0.05~0.2%，CaCl₂ 0.005~0.02%和MgSO₄·7H₂O 0.01~0.1%，余量为水；

（4）将步骤（3）得到的所述发酵液经离心后超滤，收集分子量位于[10k，100k）区间内的组分，得纳豆激酶提取液。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，步骤（1）所述活化培养的温度为35~40℃，湿度为60~70% RH，培养时间为24~48h。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，步骤（2）所述种子培养为摇床培养。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述摇床培养的温度为35~40℃，转速为200~250rpm/min，培养时间为10~20h。

5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，步骤（3）所述发酵的温度为35~40℃，时间为20~30h。

6.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，步骤（4）所述离心的转速为8000~15000rpm，离心时间为5~12min。

7.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，步骤（4）所述超滤时还包括离心的操作，所述离心转速为3000~3750rpm，离心时间为6~8h。