[发明专利]一种降二萜化合物及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及药物化学、微生物医药技术领域，具体的说是一种从海洋真菌温特曲霉(Aspergillus wentii)的发酵产物中得到降二萜类化合物及其分离纯化方法和抑制水产病害菌活性方面的应用。所述降二萜化合物为式I所示化合物1和化合物2，化合物1和化合物2是一对同分异构体，其分子式均为C₁₉H₂₆O₃；抑菌活性测试表明，化合物1和化合物2对水产病害菌迟缓爱德华氏菌Edwardsiella tarda、哈氏弧菌Vibrio harveyi和副溶血性弧菌Vibrio parahaemolyticus具有显著抑制活性，其最小抑菌浓度(MIC)均为8.0μg/mL，有望发展成为新型水产病害菌防治药物。

技术领域

本发明涉及药物化学、微生物医药技术领域，具体的说是一种从海洋真菌温特曲霉(Aspergillus wentii)的发酵产物中得到降二萜化合物及其分离纯化制备方法和抑制水产病害菌活性方面的应用。

背景技术

海洋微生物次级代谢产物具有丰富的结构多样性和显著的生物活性，是药物先导化合物的重要来源。具有20-Nor-isopimarane骨架结构的降二萜化合物是一类主要由真菌产生的具有生物活性的化合物，其结构由isopimarane类二萜中C-20位甲基发生降碳后形成。

根据文献调研，本发明涉及的两个降二萜化合物是新化合物，之前没有文献报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种从海洋真菌温特曲霉(Aspergillus wentii)的发酵产物中获得降二萜化合物及其分离纯化方法和在抑制水产病害菌活性方面的应用。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：

一种降二萜化合物，降二萜化合物为式I所示，分子式均为C₁₉H₂₆O₃的化合物1或化合物2；化合物1和化合物2为一对同分异构体；

一种降二萜化合物的制备方法：

1)取生长于平板培养基中的海洋真菌温特曲霉(Aspergillus wentii)(大小2.5厘米×2.5厘米)接种于300mL PDB液体培养基中，28℃下使用摇床(200转/分钟)发酵7天，所得菌液接入到30L PDB液体培养基中，使用50L发酵罐发酵1天后，作为种子液接入300LPDB液体培养基使用500L发酵罐发酵7天，发酵产物使用乙酸乙酯反复浸泡萃取，合并萃取液进行浓缩，获得发酵粗提物；

2)粗提物进行减压硅胶柱层析，并用梯度为50:1至1:1(v/v)的石油醚-乙酸乙酯和梯度为50:1至1:1(v/v)二氯甲烷-甲醇作为溶剂依次进行梯度洗脱，收集二氯甲烷-甲醇20:1(v/v)洗脱得到的组分，进行硅胶柱层析，以10:1至1:1(v/v)的石油醚-乙酸乙酯洗脱；

3)收集上述步骤2)石油醚-乙酸乙酯5:1(v/v)的组分，再用高效液相色谱(HPLC)纯化，使用甲醇-水4:1(v/v)为流动相，收集230nm波长下21.5min的吸收峰，得到纯化目标化合物1，收集22.1min的吸收峰，得到纯化目标化合物2；

所述PDB液体培养基配方为：每升液体培养基中含土豆粉200克,葡萄糖20克，蛋白胨5克，酵母浸粉3克，海盐35克。

一种降二萜化合物的应用，所述式I中所示降二萜化合物在抑制水产病害菌中的应用。

所述式I中所示降二萜化合物在制备新型抗水产病害菌药物中的应用。

所述水产病害为迟缓爱德华氏菌Edwardsiella tarda、哈氏弧菌Vibrio harveyi或副溶血性弧菌Vibrio parahaemolyticus。

本发明所具有的优点：