[发明专利]一种牛角瓜组培快繁方法

说明书

本发明提供了一种牛角瓜组培快繁方法，属于植物组培技术领域。本发明所述方法包括以下步骤：1)以牛角瓜幼嫩组织为外植体，消毒后接种于初代诱导培养基中进行诱导培养，得初代芽苗；2)将步骤1)得到的所述初代芽苗裁成包含1～2个腋芽的茎段，置于继代培养基中进行继代培养，得丛生苗；3)将步骤2)得到的所述丛生苗置于生根培养基上进行生根培养，得牛角瓜组培快繁苗。应用本发明的方法使牛角瓜增殖系数为4.83～5.93/25d；组培苗的玻璃化率降低到4.44～8.89％，连续多代培养，玻璃化率一直维持在8％以下，各世代之间差异不显著。

技术领域

本发明属于植物组培技术领域，具体涉及一种牛角瓜组培快繁方法。

背景技术

牛角瓜(Calotropis giganteaL.)为萝藦科牛角瓜属灌木，在我国主要分布于云南、四川、广西和广东等地区，多生长于低海拔向阳山坡、旷野地及海边，其在干热河谷、盐碱地等生境下适应能力较强，可起到改善生态环境的作用。近年来，随着国内外学者对牛角瓜的深入研究，发现了牛角瓜多种应用开发价值。

首先，牛角瓜纤维密度为0.9g/cm³，是自然界质量最轻的纤维，牛角瓜绒的结构类似于木棉纤维且具有更优良的机械性能，牛角瓜绒与棉的混纺纱能够满足服饰的基本要求，被誉为继棉花纤维又一具有广泛应用前景的新型天然植物纤维。

其次，牛角瓜全株富含白色乳汁，有毒但具有药用价值。从牛角瓜乳汁中提取的牛角瓜苷等物质具有强心作用；牛角瓜根及花的提取物具有抗炎、镇痛、退热等作用；此外，牛角瓜的不同提取物还具有护肝、促进伤口愈合、抗氧化等多种作用。早在20世纪60年代昆明医学院邓士贤等就对云南的牛角瓜根皮提取的牛角瓜苷进行研究，分别用两栖动物活体心脏、哺乳动物离体心脏等为实验对象，发现牛角瓜苷具有强心作用，并计算出鸟类致死的最小剂量。国外学者对牛角瓜的化学成分及其药用机理进行了大量研究，关于强心苷的抗肿瘤作用已在美国获得专利。

另外，牛角瓜被称为“石油植物”，其汁液中含有大量碳氢化合物及部分烃类物质，与天然石油成分近似，其汁液中含有多种化学成分，印度产的牛角瓜植株中油脂含量为4.7％，热值与原煤接近，被认为可用来开发液体燃料和有用化学品。由于牛角瓜生长速度快，每周可长30cm，能多茬收获，生物量大。因此，作为能源植物开发具有重要意义。

经过国内外科研工作者的研究证实，牛角瓜在棉纺织领域、医药领域和生物质能源开发领域等都具有重要的应用价值，但是牛角瓜分布范围广且较为分散，到目前为止，并没有形成一套有效的引种驯化和集约化栽培技术，严重阻碍牛角瓜的推广应用。

虽然牛角瓜组培技术目前已有报道，但研究相对较少，且有两个影响产业效率的主要问题并未解决：一是牛角瓜组培苗增殖系数较低，仅为3.9/25d(唐军荣等，2016)；二是牛角瓜组培快繁过程中极易玻璃化，且随着继代次数的增多，玻璃化加重，最终导致负增殖。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种牛角瓜组培快繁方法，可以抑制牛角瓜组培苗的玻璃化，并提高增殖系数。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种牛角瓜组培快繁方法，包括以下步骤：

1)以牛角瓜幼嫩组织为外植体，消毒后接种于初代诱导培养基中进行诱导培养，得初代芽苗；所述初代诱导培养基以MS培养基为基础培养基，包括：蔗糖25～35g·L^-1和琼脂3.4～4g·L^-1；