[发明专利]一种检测银离子的方法

权利要求书

1.一种检测Ag⁺的方法，其特征在于利用设计并合成的、可与Ag⁺通过碱基错配识别的生物分子，并将其组装到具有中空、多孔结构特性的纳米金载体表面，一方面作为“孔帽”用于封堵纳米载体的孔口，防止孔内染料分子的外泄；另一方面作为Ag⁺的识别探针可与Ag⁺发生特异性的碱基错配识别反应，形成C-Ag⁺-C碱基对的同时发生构象转化而脱离纳米金载体表面，从而使封堵的“孔帽”被打开，纳米载体内的染料分子得以释放；同时，所设计并合成的可与Ag⁺通过碱基错配识别的生物分子与Ag⁺的结合物能够被核酸外切酶剪切，将Ag⁺从错配的碱基对C- Ag⁺-C中释放出来，循环回到溶液中，并与其他可与Ag⁺通过碱基错配识别的生物分子结合，从而释放出更多的染料分子，最终利用循环放大的荧光信号实现Ag⁺的高灵敏检测，测定步骤如下：

(1) 设计并合成可与Ag⁺通过碱基错配识别的、具有一定碱基长度的、富含胞嘧啶的核酸生物分子，该核酸生物分子能够与Ag⁺发生特异性的碱基错配识别反应，并且，它和银离子的结合产物能够被核酸外切酶剪切；

(2) 将磁珠与具有中空、多孔结构的纳米金载体溶液混合，加入聚二烯丙基二甲基氯化铵溶液，10-12 h后磁分离，用MOPS缓冲溶液清洗；

(3) 加入染料分子溶液，10-12 h后加入(1)步设计并合成的、可识别Ag⁺的核酸生物分子溶液，10-12 h后磁分离，用MOPS缓冲溶液清洗；

(4) 将含有Ag⁺的待测样品溶液加入到(3)步制得的复合材料中，用MOPS缓冲溶液pH=7.0稀释，加入核酸外切酶，37℃恒温振荡2-3 h；

(5) 磁分离，取上清液，进行荧光检测;

所述的可与Ag⁺通过碱基错配识别的核酸生物分子，其碱基序列为5’-TCC TCC CTC CTTAAG GAA CCA CCC ACC A-3’;所述的核酸外切酶是ExoⅢ。

2.一种如权利要求1所述的检测Ag⁺的方法，其特征在于：所述的染料分子是罗丹明B。