[发明专利]鉴定犬细小病毒的成套试剂和试剂盒

说明书

本发明公开了鉴定犬细小病毒的成套试剂和试剂盒。本发明公开的鉴定犬细小病毒的成套试剂，由名称分别为CPV‑F3、CPV‑B3、CPV‑FIP、CPV‑BIP、CPV‑FLP和CPV‑BLP的六条单链DNA组成；所述CPV‑F3、所述CPV‑B3、所述CPV‑FIP、所述CPV‑BIP、所述CPV‑FLP和所述CPV‑BLP的序列分别为序列表中序列1‑6。实验证明，利用本发明的鉴定犬细小病毒的成套试剂鉴定犬细小病毒方便快速，特异性好，灵敏度高。

技术领域

本发明涉及生物技术领域中，鉴定犬细小病毒的成套试剂和试剂盒。

背景技术

犬细小病毒(Canine Parvovirus,CPV)属于细小病毒科，最早于1978分离自患肠炎的犬类粪便中；CPV感染会引起犬细小病毒肠炎，是全球范围流行的犬类烈性传染病之一。其病程短、传染性强、死亡率高的特征对犬类危害很大，需要有快速准确的诊断方法，以便及时治疗。

CPV的快速检测主要有基于血清蛋白的免疫性检测和针对病毒DNA的基因检测。基因检测包括常规PCR扩增和荧光定量PCR检测。

LAMP扩增是日本的Notomi等人发明的一种恒温扩增方法，其特点是降低了对仪器的要求，只需要一个水浴锅等恒温设施即可反应。不过常规的LAMP扩增还是需要专门的检测设备，不便于现场检测需求。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是如何鉴定犬细小病毒。

为解决上述技术问题，本发明首先提供了一种成套试剂，所述成套试剂由名称分别为CPV-F3、CPV-B3、CPV-FIP、CPV-BIP、CPV-FLP和CPV-BLP的六条单链DNA组成；所述CPV-F3、所述CPV-B3、所述CPV-FIP、所述CPV-BIP、所述CPV-FLP和所述CPV-BLP的序列分别为序列表中序列1-6。

所述成套试剂具备如下(b1)、(b2)、(b3)或(b4)的用途：

(b1)鉴定或辅助鉴定犬细小病毒；

(b2)制备用于鉴定或辅助鉴定犬细小病毒的试剂盒；

(b3)检测或辅助检测待测样本是否含有犬细小病毒；

(b4)制备用于检测或辅助检测待测样本是否含有犬细小病毒的试剂盒。

所述成套试剂中，所述CPV-F3、所述CPV-B3、所述CPV-FIP、所述CPV-BIP、所述CPV-FLP和所述CPV-BLP的摩尔比可为1:1:8:8:2:2。

所述成套试剂中，所述CPV-F3、所述CPV-B3、所述CPV-FIP、所述CPV-BIP、所述CPV-FLP和所述CPV-BLP

本发明还提供了鉴定或辅助鉴定犬细小病毒的系统，所述系统含有所述成套试剂和M；所述M为链置换型DNA聚合酶和/或进行环介导等温扩增所需要的其它试剂。

所述链置换型DNA聚合酶可为Bst DNA聚合酶。所述可为Bst2.0 DNA聚合酶，如NEB公司的Bst2.0 DNA聚合酶。所述进行环介导等温扩增所需要的其它试剂可为10mM(NH₄)₂SO4(美国Amresco公司)、50mM KCl(美国Amresco公司)、8mM MgSO₄(北京美莱博医学科技有限公司)、50uM中性红(美国Sigma公司)、0.1％20(美国Amresco公司)、0.5M甜菜碱(美国Sigma公司)和/或1.4mM dNTPs(北京美莱博医学科技有限公司)。

所述系统可为环介导等温扩增试剂或试剂盒。所述系统可由所述成套试剂与所述M组成。