[发明专利]一种副猪嗜血杆菌增殖培养基及其制备方法

说明书

本发明属于微生物培养技术领域，特别涉及一种副猪嗜血杆菌增殖培养基及其制备方法。增殖培养基由以下重量份的原料制成：胰蛋白酶消化物15份、大豆粉木瓜蛋白酶消化物5份、氯化钠0‑6份、酵母提取物0‑0.6份、葡萄糖0‑0.6份、可溶性淀粉0‑2份、复合维生素0.1份、甘氨酸0.1份、蒸馏水1000份。本发明培养基优化了副猪嗜血杆菌纯培养过程，大大缩减培养周期，能够短时间内满足科学研究和灭活疫苗研制过程中活菌数的要求。

技术领域

本发明属于微生物培养技术领域，特别涉及一种副猪嗜血杆菌增殖培养基及其制备方法。

背景技术

嗜血杆菌属，小到中等大小的球形、卵圆或杆状细胞，宽度一般≤1.0μm，有时有丝状体，明显的多形态，革兰氏阴性、不运动、兼性厌氧。几乎所有的嗜血杆菌种都需要血的生长因子，特别是X因子(原卟啉IX或正铁血红素)和/或V因子(烟酰胺腺嘌呤二核苷酸，也称为辅酶I)或烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(也称为辅酶Ⅱ)；具有呼吸和发酵代谢类型，最适生长温度35～37℃，从D-葡萄糖和其他糖类产酸，少数种产气，还原硝酸盐到亚硝酸盐或进一步还原，氧化酶和接触酶因种而异。嗜血杆菌属是人和动物黏膜上的专性寄生菌，隶属于巴斯德菌科，该属细菌共有17个种，其中与临床有关的有：流感嗜血杆菌、副流感嗜血杆菌、溶血嗜血杆菌、副溶血嗜血杆菌、杜克嗜血杆菌、埃及嗜血杆菌、嗜沫嗜血杆菌、副嗜沫嗜血杆菌、迟缓嗜血杆菌、副猪嗜血杆菌等。

副猪嗜血杆菌是能引起猪致死性败血症的嗜血杆菌种，一直给禽类养殖造成重大的经济损失，因此，也一直是微生物领域众多科研人员研究的重点。为对副猪嗜血杆菌扩大培养，为副猪嗜血杆菌的疫苗研究提供大量副猪嗜血杆菌，本发明设计了一种副猪嗜血杆菌增殖培养基。

发明内容

本发明培养基优化了副猪嗜血杆菌纯培养过程，大大缩减培养周期，能够短时间内满足科学研究和灭活疫苗研制过程中活菌数的要求。

本发明提供了一种副猪嗜血杆菌增殖培养基，由以下重量份的原料制成：

胰蛋白酶消化物15份、大豆粉木瓜蛋白酶消化物5份、氯化钠0-6份、酵母提取物0-0.6份、葡萄糖0-0.6份、可溶性淀粉0-2份、复合维生素0.1份、甘氨酸0.1份、蒸馏水1000份。

优选的，由以下重量份的原料制成：胰蛋白酶消化物15份、大豆粉木瓜蛋白酶消化物5份、氯化钠5份、酵母提取物0.5份、葡萄糖0.5份、可溶性淀粉1份、复合维生素0.1份、甘氨酸0.1份、蒸馏水1000份。

一种上述的副猪嗜血杆菌增殖培养基的制备方法，包括以下步骤：

S1，按以下重量份称取各组分：胰蛋白酶消化物15份、大豆粉木瓜蛋白酶消化物5份、氯化钠0-6份、酵母提取物0-0.6份、葡萄糖0-0.6份、可溶性淀粉0-2份、复合维生素0.1份、甘氨酸0.1份、蒸馏水1000份；

其中将蒸馏水分成两份，第一份与第二份的重量比为1:99；

S2，将S1中称取的胰蛋白酶消化物、大豆粉木瓜蛋白酶消化物、氯化钠、酵母提取物、葡萄糖、可溶性淀粉以及第二份蒸馏水混合，121℃、20min条件下高压灭菌，然后放凉至50℃，得基础培养基；

S3，将S1中称取的复合维生素、甘氨酸以及第一份蒸馏水混合，搅匀并过孔径为0.22μm的滤膜，收集滤液；

S4，将S3的滤液与S2的基础培养基混匀，放凉至室温，得副猪嗜血杆菌增殖培养基。

与现有技术相比，本发明的有益效果：

本发明增加维生素类和氨基酸类物质，并取得了较好的优化结果，增殖效果明显，优化了副猪嗜血杆菌纯培养过程，大大缩减培养周期，能够短时间内满足科学研究和灭活疫苗研制过程中活菌数的要求；优于传统商品化的TSB培养基，降低了成本，为副猪嗜血杆菌的研究及疫苗的研制奠定基础。

附图说明