[发明专利]分解甲醛用自然循环微生物菌剂及其制备方法

权利要求书

1.一种分解甲醛用自然循环微生物菌剂，其特征在于，由以下组分制成，所述组分包括：

乳清蛋白提取物、生物酶、溶杆菌C8-1、分枝杆菌YC-RL4、柠檬酸杆菌、屎肠球菌和布拉迪酵母菌。

2.根据权利要求1所述的分解甲醛用自然循环微生物菌剂，其特征在于，所述原料按重量份包括：

乳清蛋白提取物2-4份、生物酶0.1-0.3份、溶杆菌C8-1、分枝杆菌YC-RL4和柠檬酸杆菌各3-7份、屎肠球菌1-2份和布拉迪酵母菌2-4份。

3.根据权利要求1或2所述的分解甲醛用自然循环微生物菌剂，其特征在于，所述溶杆菌C8-1，选购自中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏号：CGMCCNo.116271；分枝杆菌YC-RL4，选购自中国普通微生物菌种保藏管理中心，其保藏编号为CGMCC No.10993；柠檬酸杆菌，选购自中国普通微生物菌种保藏管理中心，菌种保藏号为CGMCC No.15120；屎肠球菌选购自中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏号：CGMCCNo.12334；布拉迪酵母菌选购自中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏号：CGMCCNo.10381。

4.一种制备如权利要求1至3任一所述的分解甲醛用自然循环微生物菌剂的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

(1)乳清蛋白提取物的制备：将乳清蛋白粉加入其重量的10-15倍的水溶解后，经85℃预热10min，然后冷却到45-50℃，pH值调至8.3-8.7，保温10-15min后加入胰蛋白酶进行酶解，所述酶解过程中保持pH值为8.3-8.7，所述酶解的时间为2.5-3.5小时，然后沸水浴灭酶10-15min，得到乳清蛋白酶解物；将所述乳清蛋白酶解物冷却至室温，调pH至7.0，离心取上清液，用超滤膜进行超滤，冷冻干燥得到乳清提取物；

(2)菌的活化：先将溶杆菌C8-1、分枝杆菌YC-RL4、柠檬酸杆菌、屎肠球菌和布拉迪酵母菌分别使用LB培养基在37℃进行活化，得到溶杆菌C8-1活化液、分枝杆菌YC-RL4活化液、柠檬酸杆菌活化液、屎肠球菌活化液和布拉迪酵母菌活化液；

(3)菌的培养：将步骤(2)得到的溶杆菌C8-1种子液、分枝杆菌YC-RL4种子液、柠檬酸杆菌种子液、屎肠球菌种子液和布拉迪酵母菌种子液分别接种到液体培养基中，分别独立培养，接种量为液体培养基体积的1-3％，培养24小时，摇床转速为100rpm，得到溶杆菌C8-1种子液、分枝杆菌YC-RL4种子液、柠檬酸杆菌种子液、屎肠球菌种子液和布拉迪酵母菌；

(4)混合：将步骤(3)得到的溶杆菌C8-1种子液、分枝杆菌YC-RL4种子液、柠檬酸杆菌种子液、屎肠球菌种子液和布拉迪酵母菌与步骤(1)得到的乳清蛋白提取物按比例混合，混合液离心、超滤后和生物酶混合，

混合均匀即得所述分解甲醛用自然循环微生物菌剂。

5.根据权利要求4所述的制备分解甲醛用自然循环微生物菌剂的方法，其特征在于，步骤(1)中，采用分子量为20000Da的超滤膜进行超滤，取滤过液。

6.根据权利要求4所述的制备分解甲醛用自然循环微生物菌剂的方法，其特征在于，步骤(2)中，得到的溶杆菌C8-1活化液、分枝杆菌YC-RL4活化液、柠檬酸杆菌活化液、屎肠球菌活化液和布拉迪酵母菌活化液的浓度均为3×10⁶CFU/mL-8×10⁶CFU/mL。

7.根据权利要求4所述的制备分解甲醛用自然循环微生物菌剂的方法，其特征在于，步骤(3)中，液体培养基为：葡萄糖15g/l，大豆蛋白胨4.8g/l，酵母浸膏2.5g/l，柠檬酸铵1.8g/l，乙酸钠5g/l，K₂HPO₄ 2g/l，吐温80 1ml/l，MgSO₄·7H₂O 0.6g/l，MnSO₄·4H₂O：0.3g/l，水定容到1L。