[发明专利]一种利用微生物制备苯酚类化合物的方法

说明书

本发明公开了一种利用微生物制备苯酚类化合物的方法，属于微生物化学技术领域，从Gliocladium roseum CGMCC 3.3657发酵液乙酸乙酯粗提物中分离得到4个苯酚类化合物,经核磁共振波谱分别鉴定为对羟基苯甲醛(1)、对羟基苯甲酸(2)、3,4‑二羟基苯甲酸(3)、3,5‑二羟基苯甲酸(4)。采用中压制备色谱、硅胶柱层析法分离次生代谢产物,通过核磁共振技术进行化合物结构鉴定，该4种化合物均为首次从该品种中分离得到，产量高，菌种易获取，进一步挖掘了该菌株的应用价值,为生产相关药品提供了新的技术。

技术领域

本发明涉及微生物化学技术领域，具体为一种利用粉红粘帚霉真菌制备苯酚类化合物的方法。

背景技术

粉红粘帚霉(Gliocladium roseum Bainier.)属半知菌门, 丝孢纲, 丛梗孢目,丛梗孢科, 粘帚霉属, 是一种分布广泛的土壤习居菌和重寄生菌, 具有生长速度快、产孢量大、寄主范围广、寄生能力强、拮抗机制多样等优点。粉红粘帚霉是农业生物防治上极具潜力的生防因子之一。它能产生几丁质酶、纤维素酶、蛋白酶等细胞壁降解霉, 从而侵染核盘菌、禾谷镰刀菌、立枯丝核菌、灰葡萄孢等多种对瓜果蔬菜、观赏性植物、水稻具有危害的病原真菌细胞壁, 达到生物防治的作用, 避免化学防治所带来的环境污染、农药残留以及病菌抗药性等问题。它在重金属生物修复中也具有潜在的应用价值。有研究发现Gliocladium roseum能使不溶性碳酸铅转化成可溶性草酸铅, 可修复采矿场周围重金属的污染。粉红粘帚霉次生代谢物具有显著的杀线虫能力。

学者Dong等从菌株编号为YMF1.00133的粉红粘帚霉属小麦固体发酵物中分离出一系列具有杀线虫作用的化合物gliocladine A-E, verticillin A, 11'-deoxyverticillin A, sch52900 and sch52901。学者Song等继续Dong的研究从Gliocladium roseum YMF1.00133小麦固体发酵物中分离得到两个具有杀线虫活性化合物gliocladin C、5-n-heneicosylresorcinol。粉红粘帚霉真菌在微生物转化方面也有很好的应用前景。

Gliocladium roseum可通过经济环保、绿色可持续的方法进行生物合成球形、结晶、单分散的硒纳米粒子。Andre´s Garcı´a-Granados使用Gliocladium roseum CECT2733微生物转化方法实现了化学方法很难实现的倍半萜-4-羟基琥珀酸-1,6-二酮C-11位羟基化的转化获得三个新化合物。学者Fu使用Gliocladium roseum CGMCC 3.3657实现了结构复杂的天然产物熊果酸饱和碳上的羟基化反应, 此生物转化新产物较熊果酸具有较好的抗HCV活性。Fu还发现Gliocladium roseum CGMCC 3.3657对刺囊酸的微生物转化可作为改造齐墩果酸五环三萜类化合物A环的新方法。

粉红粘帚霉应用广泛,可进一步研究其应用价值, 为新药的开发和寻找新颖的化合物提供帮助。

发明内容

本发明通过对粉红粘帚霉Gliocladium roseum CGMCC 3.3657的液体发酵产物进行了研究, 从其乙酸乙酯提取物中分离得到4个苯酚类化合物：对羟基苯甲醛、对羟基苯甲酸、3,4-二羟基苯甲酸、3,5-二羟基苯甲酸，化学式为：

所述粉红粘帚霉菌种名为Gliocladium roseum， 保藏于中国普通微生物菌种保藏中心，保藏编号为CGMCC 3.3657。