[发明专利]一种坚强芽孢杆菌菌粉的制备方法在审
申请号: | 201810928086.2 | 申请日: | 2018-08-15 |
公开(公告)号: | CN108913636A | 公开(公告)日: | 2018-11-30 |
发明(设计)人: | 戴宝;徐景超;李纪顺;窦立志;邱德文;徐文浩;刘永红 | 申请(专利权)人: | 山东泰诺药业有限公司 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12R1/07 |
代理公司: | 潍坊正信致远知识产权代理有限公司 37255 | 代理人: | 刘新子 |
地址: | 262200 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 菌粉 制备 坚强芽孢杆菌 灭菌 发酵培养 喷雾干燥 培养基 病死 上料 摇瓶 接种 冷却 车间 检测 制作 | ||
1.一种坚强芽孢杆菌菌粉的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
一、实验室操作
(1)环境灭菌:将无菌室以及无菌操作台紫外杀菌灯打开灭菌2小时;
(2)培养基制作:制作液体培养基,用于摇瓶培养基的制作;
(3)灭菌:将培养基等放入灭菌锅内灭菌,冷却后取出;
(4)接摇瓶:在无菌环境下将斜面上的菌种用接种环接到摇瓶内;
(5)培养:将摇瓶放入摇床内,在29±0.5℃情况下培养16-18h;
二、车间操作
(1)空消:将刷洗干净的发酵罐用高温蒸汽进行消毒45分钟;
(2)上料:将准确称量的培养基倒入发酵罐内,加入适量的水;
(3)实消:再用高温蒸汽进行灭菌;
(4)冷却接种:当发酵罐温度冷却到28±0.5℃时,用火焰保护法将摇瓶内的菌种接入到发酵罐内;
(5)发酵培养:在转速90-110r/min,6-7PH的条件下,进行培养24-36小时;
(6)检测:从第18小时开始用显微镜检测细菌形态、细菌个数、芽孢形成率;
(7)喷雾干燥:加入适量吸附载体,搅拌,喷雾干燥出菌粉。
2.根据权利要求1所述的一种坚强芽孢杆菌菌粉的制备方法,其特征在于,所述培养基由以下重量份的原料制成:玉米粉15-25份、葡萄糖2-6份、豆饼粉18-24份、鱼粉2-6份、轻质碳酸钙7-11份、硫酸铵1-2份、磷酸氢二钾0.4-0.6份、七水硫酸镁0.05-0.15份、氯化钠0.05-0.15份。
3.根据权利要求2所述的一种坚强芽孢杆菌菌粉的制备方法,其特征在于,所述培养基由以下重量份的原料制成:玉米粉20份、葡萄糖4份、豆饼粉21份、鱼粉4份、轻质碳酸钙9份、硫酸铵1.5份、磷酸氢二钾0.5份、七水硫酸镁0.1份、氯化钠0.1份。
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