[发明专利]一种对成骨细胞增殖具有促进作用的猪皮明胶肽的制备方法及应用

权利要求书

1.一种对成骨细胞增殖具有促进作用的猪皮明胶肽的制备方法，其特征在于，所述的制备方法包含以下步骤：

步骤一：称取猪皮明胶，用去离子水配制成明胶溶液；

步骤二：向明胶溶液中添加木瓜蛋白酶、中性蛋白酶或碱性蛋白酶，蛋白酶水解猪皮明胶，调节体系pH值，在40℃的温度下水解0.25小时至15小时；

步骤三：水解结束后，立即将水解溶液加热至沸腾15分钟，使蛋白酶灭酶、终止反应；冰水浴冷却后，离心处理收集上清液，得到猪皮明胶肽溶液；

步骤四：通过真空冷冻干燥处理猪皮明胶肽溶液，恒重后于-20℃保存，得到对成骨细胞增殖具有促进作用的猪皮明胶肽。

2.根据权利要求1所述的对成骨细胞增殖具有促进作用的猪皮明胶肽的制备方法，其特征在于，步骤一中明胶溶液的质量浓度为5％(w/w)。

3.根据权利要求1所述的对成骨细胞增殖具有促进作用的猪皮明胶肽制备方法，其特征在于，步骤二中添加木瓜蛋白酶水解猪皮明胶，所述木瓜蛋白酶的添加量为5千活力单位/克蛋白质，调节体系pH值为6.0，水解时间为12.5小时。

4.根据权利要求1所述的对成骨细胞增殖具有促进作用的猪皮明胶肽的制备方法，其特征在于，步骤二中添加中性蛋白酶水解猪皮明胶，所述中性蛋白酶的添加量为6千活力单位/克蛋白质，调节体系pH值为7.0，水解时间为12.5小时。

5.根据权利要求1所述的对成骨细胞增殖具有促进作用的猪皮明胶肽的制备方法，其特征在于，步骤二中添加碱性蛋白酶水解猪皮明胶，所述碱性蛋白酶的添加量为7千活力单位/克蛋白质，调节体系pH值为8.5，水解时间为12.5小时。

6.根据权利要求1所述的对成骨细胞增殖具有促进作用的猪皮明胶肽的制备方法，其特征在于，步骤三中离心处理收集上清液的离心速率为5000转/分钟，离心时间为20分钟。

7.根据权利要求1所述的对成骨细胞增殖具有促进作用的猪皮明胶肽的制备方法，其特征在于，步骤四中所述的真空冷冻干燥过程中，控制真空度为0.01毫帕至0.5毫帕,干燥时间为8小时至18小时,冷阱温度为-72℃至-45℃。

8.对成骨细胞增殖具有促进作用的猪皮明胶肽的应用，其特征在于，这一对成骨细胞增殖具有促进作用的猪皮明胶肽可以作为功能性组分而应用于功能性食品或保健食品中。