[发明专利]用于木质纤维素的全菌糖化方法在审
申请号: | 201810939280.0 | 申请日: | 2018-08-17 |
公开(公告)号: | CN109055459A | 公开(公告)日: | 2018-12-21 |
发明(设计)人: | 崔球;刘亚君;祁宽;刘世岳;李仁民;冯银刚 | 申请(专利权)人: | 中国科学院青岛生物能源与过程研究所 |
主分类号: | C12P19/14 | 分类号: | C12P19/14;C12P19/02;C12R1/145;C12R1/01 |
代理公司: | 青岛合创知识产权代理事务所(普通合伙) 37264 | 代理人: | 傅培 |
地址: | 266000 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 糖化 全菌 木质纤维素原料 预处理 葡萄糖 木质纤维素 驯化 预浸渍 种子液 传代 葡萄糖培养基 培养基溶液 种子液接种 唯一碳源 纤维小体 厌氧条件 种子培养 培养基 菌株 糖液 接种 优化 诱导 进程 | ||
1.用于木质纤维素的全菌糖化方法,其特征在于:包括以下步骤:
(1)种子液优化:在厌氧条件下,将产纤维小体菌株在葡萄糖培养基中进行传代驯化;然后接种到添加了预处理后的木质纤维素原料的葡萄糖培养基中进行诱导驯化,从而获得优化后的全菌糖化种子液;所述葡萄糖培养基是以葡萄糖为唯一碳源的培养基;
(2)原料预浸渍:按照一定的固液重量体积比,将预处理后的木质纤维素原料和培养基溶液在容器中混合均匀,并持续一定时间;所述预处理后的木质纤维素原料与步骤(1)中相同;
(3)全菌糖化:将步骤(1)优化的全菌糖化种子液接种到步骤(2)得到的预浸渍后的反应体系中,并在0.5-100r/min的转速条件下进行糖化反应,得到含有葡萄糖的糖液。
2.根据权利要求1所述的用于木质纤维素的全菌糖化方法,其特征在于:步骤(1)所述葡萄糖培养基中葡萄糖的浓度为1-20g/L;所述传代驯化进行2-5次;所述木质纤维素原料的添加量为0.1-2.0g/L。
3.根据权利要求1所述的用于木质纤维素的全菌糖化方法,其特征在于:所述诱导驯化的温度条件为34-65℃;所述诱导驯化的时间为12-48小时。
4.根据权利要求1所述的用于木质纤维素的全菌糖化方法,其特征在于:步骤(2)所述的木质纤维素原料与培养基溶液的固液重量体积比为1:3-1:50;所述的木质纤维素原料和培养基溶液在0.5-100r/min的转速条件下混合均匀并持续1-48h。
5.根据权利要求4所述的用于木质纤维素的全菌糖化方法,其特征在于:所述容器为带有搅拌桨的厌氧发酵设备或者厌氧旋转混匀器。
6.根据权利要求1所述的用于木质纤维素的全菌糖化方法,其特征在于:步骤(3)所述的全菌糖化种子液的接种量为0.1-10%的体积分数。
7.根据权利要求1-6中任意一项所述的用于木质纤维素的全菌糖化方法,其特征在于:其中,所述的产纤维小体菌株为热纤梭菌、黄色溶纤梭菌、嗜纤维梭菌、解纤维梭菌、解纤维醋弧菌、溶纤维假拟杆菌、白色瘤胃球菌或黄化瘤胃球菌。
8.根据权利要求1-6中任意一项所述的用于木质纤维素的全菌糖化方法,其特征在于:所述的预处理为碱法、稀酸法、水热法、汽爆法和磺化法预处理技术中的一种或多种的组合。
9.根据权利要求1-6中任意一项所述的用于木质纤维素的全菌糖化方法,其特征在于:所述木质纤维素原料为玉米秸秆、麦秸、灌木条枝、木片、、玉米芯、稻草和废纸中的一种或多种的组合。
10.根据权利要求1-6中任意一项所述的用于木质纤维素的全菌糖化方法,其特征在于:步骤(1)所述的葡萄糖培养基为每升水中添加磷酸氢二钾2.9g/L、磷酸二氢钾1.5g/L、尿素0.8g/L、氯化钙0.1g/L、氯化镁1.8g/L、硫酸亚铁0.0005g/L、硫化钠2g/L、玉米浆4g/L、柠檬酸三钠2g/L、葡萄糖1-20g/L、pH 6.5-7.5。
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