[发明专利]固定化全细胞一步酶法催化制备β-烟酰胺单核苷酸在审
| 申请号： | 201810940729.5 | 申请日： | 2018-08-17 |
| 公开（公告）号： | CN108949865A | 公开（公告）日： | 2018-12-07 |
| 发明（设计）人： | 竺伟;张小飞 | 申请（专利权）人： | 尚科生物医药（上海）有限公司 |
| 主分类号： | C12P19/30 | 分类号： | C12P19/30 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 201318 上海市浦*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 烟酰胺 单核苷酸 固定化 全细胞 制备 磷酸核糖焦磷酸合成酶 烟酰胺磷酸核糖转移酶 合成 全细胞催化 高效生物 磷酸核糖 酶法合成 一步酶法 复杂度 催化 生产成本 | ||
【权利要求书】：
1.一种新的酶法催化制备β-NMN的方法，其特征在于：以D-5磷酸核糖和烟酰胺为底物，在ATP存在下，通过固定化共表达磷酸核糖焦磷酸合成酶和烟酰胺磷酸核糖转移酶的全细胞催化一步实现β-NMN的生物合成。
2.根据权利要求1所述方法，其特征在于:所述固定化共表达的磷酸焦磷酸合成酶和烟酰胺焦磷酸转移酶的形态可以是菌体细胞、酶液、酶粉或者固定化酶、固定化细胞。
3.根据权利要求1所述方法，其特征在于:所述的反应温度为30-45℃，优选37℃。
4.根据权利要求1所述方法，其特征在于:所述的反应缓冲液为磷酸盐缓冲液、三乙醇胺缓冲液、Tris-Hcl缓冲液。
5.根据权利要求1所述方法，其特征在于:反应所需要的pH＝7.0-8.5，优选8.3。
6.根据权利要求1所述方法，其特征在于:反应所需要MgCl2的浓度为1-50mM，优选20mM。
7.根据权利要求1所述方法，其特征在于:反应所需要MnSO4的浓度为1-100mM，优选40mM。
8.根据权利要求1所述方法，其特征在于:所述的菌体微生物为大肠杆菌，酵母，动物细胞。
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