[发明专利]抗空肠弯曲菌感染的短肽及其应用

说明书

本发明属于蛋白工程领域，具体涉及抗空肠弯曲菌感染的短肽及其应用。所述短肽具有18‑20个氨基酸且含有SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2或SEQ ID NO：3所示的序列。本发明获得了空肠弯曲菌PEB1的优势表位，且由优势表位重组获得的重组蛋白具有良好的免疫原性，能够发挥良好的免疫保护作用。本发明对制备多价表位疫苗的研究具有重要的实际和理论意义。

技术领域

本发明属于蛋白工程领域，具体涉及短肽及其相关应用。

背景技术

空肠弯曲菌（Campylobacter jejuni）属于革兰氏阴性微需氧菌，它是主要食源性病原菌，也是旅行者腹泻的主要致病菌。在其感染后可引起急性胃肠炎、胆囊炎、脑膜炎、脓毒血症等。最严重的并发症为Miller-Fischer和Guillain-Barré综合症。近年来已超过沙门氏菌、大肠杆菌，成为导致急性腹泻最常见的病原微生物，感染者甚至因其致死。空肠弯曲菌的感染致病已成为严重的公共卫生问题。

空肠弯曲菌能通过快速黏附定植、侵袭空肠上皮细胞、大量释 放毒素引发溃疡、腹泻、血便等病变。随着空肠弯曲菌对喹诺酮类药物和红霉素的耐药性不断增强，这就对空肠弯曲菌的预防和治疗的方法提出了更加紧迫的需求，而通过接种疫苗途径可能是预防控制空肠弯曲菌感染的较好策略。

感染外膜黏附蛋白（PEB1）是空肠弯曲菌表面的一种黏附蛋白，PEB1由peb1A基因编码，其基因序列在不同的临床菌株中相对保守。研究显示其在在不同的血清型空肠弯曲菌中均有表达，而动物实验表明是一种有效的保护性抗原。新近研究表明，表位疫苗是对抗多种病原菌的一种有效手段，如UreB_403-420能够对幽门螺旋杆菌的感染产生免疫保护，而SEB_97-114能够显著降低金黄色葡萄球菌感染小鼠后的死亡率。因此，研究空肠弯曲菌PEB1的优势表位对制备多价表位疫苗的研究具有重要的实际和理论意义。

发明内容

为了实现上述目的，本发明以PEB1为研究对象，采用合成重叠肽技术和ELISA分析方法，对PEB1抗原中包含的B细胞应答的免疫优势表位进行系统的筛选，并评价了其保护效果，最终获得了性能优异的优势表位和重组蛋白。因此，本发明第一方面提供了一种抗空肠弯曲菌感染的短肽，该短肽具有18-20个氨基酸且含有SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2或SEQ IDNO：3所示的序列。

本发明第二方面提供了一种重组蛋白，该重组蛋白为连接有下述（1）或（2）的偶联蛋白：

（1）如前所述的短肽；

（2）含有通过多肽接头连接的第一序列、第二序列和第三序列的蛋白，所述第一序列具有18-20个氨基酸且含有SEQ ID NO：1所示的序列，所述第二序列具有18-20个氨基酸且含有SEQ ID NO：2所示的序列，所述第三序列具有18-20个氨基酸且含有SEQ ID NO：3所示的序列；

或者，所述重组蛋白具有54-70个氨基酸且含有SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2和SEQID NO：3所示的序列。

本发明第三方面提供了编码所述重组蛋白的核酸。

本发明第四方面提供了一种疫苗组合物，该疫苗组合物含有所述短肽、所述重组蛋白和所述核酸中的至少一种。

本发明第五方面提供了所述短肽、所述重组蛋白和所述核酸中的至少一种在制备用于治疗和/或预防空肠弯曲菌引起的疾病的药物中的应用。

通过上述技术方案，本发明获得了空肠弯曲菌PEB1的优势表位，且由优势表位重组获得的重组蛋白具有良好的免疫原性，能够发挥良好的免疫保护作用。本发明对制备多价表位疫苗的研究具有重要的实际和理论意义。

附图说明

图1是免疫后细菌定植量分析结果（图1A）及抗体滴度检测结果图（图1B）；