[发明专利]一种烟碱中次级生物碱含量的测定方法

说明书

本发明提供一种烟碱中次级生物碱含量的测定方法，采用液相色谱‑多级质谱联用的方法对所述高纯度烟碱中低含量的次级生物碱含量进行准确测定，其中次级生物碱包括麦斯明、可的宁、2S‑尼古丁‑1‑氧化物、R,S‑降烟碱、R,S‑新烟草碱、S‑假木贼碱及二烯烟碱中的一种或几种。本发明提供的测定方法，适用于高浓度甚至是高纯度烟碱中次级生物碱含量的测定，通过液相色谱对高浓度烟碱以及含量低的次级生物碱进行分离，再通过质谱对生物碱进行定性和定量的分析，检测结果准确有效。

技术领域

本发明涉及一种生物碱的测定方法，特别涉及一种烟碱中次级生物碱含量的测定方法。

背景技术

烟草制品呈现多元化发展态势，特别以电子烟为代表的新型烟草制品在世界范围内的市场规模不断扩大，具有广阔的应用前景。

烟碱是烟草和烟气中含量最丰富的生物碱，可作用于中枢神经系统，是烟草最重要的生理性活性成分，也是人们消费烟草以达到生理和心理满足感的最重要的原因。因此，为达到与真实卷烟相近的生理感受，电子烟中往往含有不同浓度的烟碱(即尼古丁)。烟碱纯度会在不同程度上影响电子烟的感官感受，采用不同的原料、不同的提取方式会使不同杂质残留在高纯度的烟碱中，如低含量的吡啶类、吡嗪类、中性香味物质，从而使电子烟的感官发生变化。

烟碱纯度的不同可直接影响电子烟的感官感受。烟碱在存放过程中会发生降解，可能会转化成次级生物碱，如降烟碱等，降烟碱的含量对烟草品质具有负面影响。

现有技术中较多地关注于对于固态烟草中次级生物碱的定性和定量的测定，对于液态烟碱中次级生物碱含量的测定较少。检测手段也是大多采用经典的液相色谱分离，并结合紫外检测技术进行定性分析，然而这样的检测技术也不准确。

为了保障产品的可靠性和稳定性，必须建立起对烟碱中次级生物碱的品控方法，这对于电子烟烟碱原料的选择、吸味品质的控制及产品稳定性都具有重要的理论意义和实用价值。

发明内容

本发明提出一种烟碱中次级生物碱含量的测定方法，用以解决上述问题。

本发明提供一种烟碱中次级生物碱含量的测定方法，采用液相色谱-多级质谱联用的方法对所述高纯度烟碱中低含量的次级生物碱含量进行准确测定，其中次级生物碱包括麦斯明、可的宁、2S-尼古丁-1-氧化物、R,S-降烟碱、R,S-新烟草碱、S-假木贼碱及二烯烟碱中的一种或几种。

进一步地，液相色谱的分析条件为：

选用C18反相色谱柱；流动相A为乙酸铵溶液，其pH为8～10.5；流动相B为x和y两种有机物混合的有机溶剂，其中x为甲酸或乙酸，y为甲醇或乙腈，x在有机溶剂中的体积比为0.025％～0.5％；采用梯度洗脱，该梯度洗脱的条件为：0～3分钟流动相A体积比保持在100％；3～23分钟流动相A体积比由100％下降至30％～40％；23～25分钟流动相A体积比由30％～40％下降至4％～6％；25～35分钟流动相A体积比保持在4％～6％；35～35.1分钟流动相A体积比由4％～6％上升至90％～100％；35.1～40分钟流动相A体积比保持在90％～100％。

C18反相色谱柱适用于烟碱液体中次级生物碱的分离。将流动相A设为乙酸铵溶液，将其pH设定为8～10.5，有利于杂质(即次级生物碱)呈现分子态。进一步地乙酸铵溶液的pH设定为10。另外，乙酸铵溶液的浓度可根据仪器或实际分析条件等因素进行选择，本发明可将乙酸铵溶液浓度设为10-30mmol/L。

本发明将流动相B设为由两种有机物x和y混合的有机溶剂。其中x为甲酸或乙酸，y为甲醇或乙腈。与单一成分的流动相B相比，在甲醇或乙腈溶剂中加入适量的甲酸或乙酸，在流动相B通过色谱柱时，可让待分离的次级生物碱解离成离子，有助于次级生物碱的分离，在质谱分析时峰形更好。对于混合有机溶剂含量的选择，本发明中x在混合溶剂中的体积百分比在0.025％～0.5％的范围内较为合适，进一步地可为0.1％。