[发明专利]阿尔茨海默病非人灵长类动物模型的构建方法

说明书

本发明涉及医药领域，特别涉及阿尔茨海默病非人灵长类动物模型的构建方法。本发明通过慢性腹腔给予小剂量硫胺素拮抗剂吡啶硫胺诱导慢性硫胺素代谢障碍，从而建立能反应阿尔茨海默病病程的非人灵长类狨猴阿尔茨海默病模型，具有操作简单，对动物损伤小等诸多优势，从而有利于更进一步的基础临床等转化研究，有更重要的科学意义和经济价值。

技术领域

本发明涉及医药领域，特别涉及阿尔茨海默病非人灵长类动物模型的构建方法。

背景技术

阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease，AD)是最常见的、以进行性认知功能衰退为主要临床特征的神经退行性疾病，已经成为严重损害包括中国在内的世界主要经济体中、老年人群健康安全和经济可持续发展的重大疾病，目前依然缺乏有效延缓或阻止疾病进展的治疗措施。

AD是一个具有多病理生理特征的复杂疾病，其病理特征主要包括脑细胞外β-淀粉样蛋白(β-amyloid,Aβ)沉积形成的炎性斑块(俗称老年斑，senile plaques,SPs)、细胞内tau过磷酸化形成的神经纤维缠结(neurofibrillary tangles,NFTs)、脑葡萄糖代谢下降、神经炎症等。目前，试图解释AD发病机制的“Aβ级联假说”仍然处于国际AD研究领域的支配地位。基于该假说，国内外AD研究领域投入大量人力物力，试图通过主动免疫(疫苗)、被动免疫(人源化抗体)、β-分泌酶和γ-分泌酶抑制剂等多种途径减少脑内Aβ沉积来阻止或延缓AD疾病进展，但相关新药临床研究均惨遭失败。基于tau异常聚集的新药研发也在临床研究阶段失败。

导致众多AD新药临床研究失败的原因很多，但归纳起来最主要的原因有两条：(1)AD主要病理生理特征之间的相互关系及其在病理损害机制中的作用仍不清楚；(2)目前AD新药临床前研究主要是基于小鼠等啮齿类动物模型开展的，由于存在种属及遗传背景等差异，与人类真实的疾病状态相距甚远。

因此，建立高度模拟人类AD疾病病理生理特征的非人灵长类动物模型，并在此基础上厘清AD主要病理生理特征之间的关系，了解他们如何相互作用并导致疾病发生发展是目前AD研究的当务之急，也是目前AD基础及临床转化研究中亟需突破的重点和难点。

多种病理生理学特征错综复杂，构成了AD复杂的疾病特征：①虽然临床试验的屡屡碰壁给“Aβ级联学说”和“tau过度磷酸化学说”带来了巨大挑战，但不可否认的是，Aβ沉积和tau过度磷酸化是AD标志性的病理生理特征。Aβ沉积和tau异常磷酸化也被认为是AD病理过程中的重要触发机制或危险因素：Aβ异常聚集导致Aβ斑块形成，诱导tau过度磷酸化和在细胞内聚集，并触发神经炎症的产生，影响突触和神经元结构与功能。②临床和基础研究均表明：脑内葡萄糖代谢障碍是AD早期即出现的恒定病理生理改变，AD患者存在脑内葡萄糖与能量代谢下降、胰岛素信号通路抵抗，这些改变明显早于临床症候的出现。脑葡萄糖代谢障碍，被证明能够促进Aβ沉积和tau过度磷酸化，同时诱发多种致病因素如线粒体功能障碍和氧化应激、神经炎症和细胞凋亡等协同作用，导致认知功能障碍和AD病理加剧。③全基因组关联分析(Genome-wide association study，GWAS)和活体影像研究均证实：神经免疫在AD发病过程早期起即主动发挥着重要作用，而非受Aβ沉积和tau过度磷酸化激活的被动反应。作为神经免疫中的重要成员，小胶质细胞在AD中发挥双重作用：一方面促进对Aβ和坏死神经元等的清除，发挥保护作用；另一方面加剧tau蛋白病理、分泌大量炎症因子等导致突触、神经元损伤。

迄今为止，上述AD病理生理特征产生的时间序列关系主要是依据家族性AD病例和啮齿类动物模型等研究判定的：Aβ代谢异常的发生可能早于tau异常磷酸化、脑葡萄糖代谢异常、突触/神经元丢失和认知功能损害的发生。但是，这个判定是否也适合迟发性AD？这些病理生理特征之间有无因果联系？他们与临床疾病发生发展之间的关系如何？这些科学问题并没有答案。