[发明专利]一种液相色谱-串联质谱检测甲氧基肾上腺素类物质的方法

权利要求书

1.一种液相色谱-串联质谱检测甲氧基肾上腺素类物质的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)样本预处理：向待检测样本中加入混合内标溶液进行蛋白沉淀，然后离心取上清液，氮气吹干所述上清液，并用复溶剂复溶，得到复溶液；

(2)将步骤(1)获得的复溶液进行纯化；

(3)利用液相色谱-串联质谱法对步骤(2)获得的纯化产物中甲氧基肾上腺素类物质进行测定。

2.根据权利要求1所述的液相色谱-串联质谱检测甲氧基肾上腺素类物质的方法，其特征在于，所述步骤(1)中混合内标溶液为含有甲氧基肾上腺素内标物、甲氧基去甲肾上腺素内标物和3-甲氧酪胺内标物的溶液。

3.根据权利要求2所述的液相色谱-串联质谱检测甲氧基肾上腺素类物质的方法，其特征在于，所述甲氧基肾上腺素内标物为碳代、氮代、氘代或氧代的稳定同位素标记的甲氧基肾上腺素；及/或，

所述甲氧基去甲肾上腺素内标物为碳代、氮代、氘代或氧代的稳定同位素标记的甲氧基去甲肾上腺素；及/或，

所述3-甲氧酪胺内标物为碳代、氮代、氘代或氧代的稳定同位素标记的3-甲氧酪胺。

4.根据权利要求2所述的液相色谱-串联质谱检测甲氧基肾上腺素类物质的方法，其特征在于，所述混合内标溶液中所述甲氧基肾上腺素内标物的浓度为3nmol/L～5nmol/L；所述甲氧基去甲肾上腺素内标物的浓度为3nmol/L～5nmol/L；所述3-甲氧酪胺内标物的浓度为15nmol/L～20nmol/L。

5.根据权利要求1所述的液相色谱-串联质谱检测甲氧基肾上腺素类物质的方法，其特征在于，所述步骤(1)中待检测样本与混合内标溶液的体积比为1：(3.0-4.0)；

所述氮气吹干温度为40℃～70℃；

所述待检测样本和所述复溶剂的体积比为1：(1.0-2.0)；所述复溶剂为5mmol/L～20mmol/L磷酸盐缓冲液溶液。

6.根据权利要求1所述的液相色谱-串联质谱检测甲氧基肾上腺素类物质的方法，其特征在于，所述步骤(2)中将复溶液进行纯化的方法为在线固相萃取。

7.根据权利要求6所述的液相色谱-串联质谱检测甲氧基肾上腺素类物质的方法，其特征在于，所述在线固相萃取的填料为弱阳性离子交换型。

8.根据权利要求7所述的液相色谱-串联质谱检测甲氧基肾上腺素类物质的方法，其特征在于，所述在线固相萃取纯化包括以下步骤：

①依次使用第一混合溶液和甲醇活化在线固相萃取柱，然后使用10-30mmol/L乙酸铵溶液平衡在线固相萃取柱；其中，所述第一混合溶液为甲酸与乙腈的按体积比为(0.1～0.3):100混合形成的混合液；

②取步骤(1)获得的复溶液进入在线固相萃取系统，上样溶液为水；

③用第二混合溶液对在线固相萃取柱进行淋洗，其中，所述第二混合溶液为甲酸与乙腈的按体积比为(0.8～1.2):1混合形成的混合液；

④洗脱，以甲酸铵含量为50-100mmol/L的水溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，所述流动相A与所述流动相B的体积比为(5-15):(85-95)。