[发明专利]一种聚己内酯-磷酸三钙骨组织工程支架进行纳米脱钙骨基质颗粒涂层修饰的方法

权利要求书

1.一种聚己内酯-磷酸三钙骨组织工程支架进行纳米脱钙骨基质颗粒涂层修饰的方法，其特征在于：包括以下步骤：

将同种异体纳米脱钙骨基质材料与75％乙醇混合，将聚己内酯-磷酸三钙骨组织工程支架浸泡于稀释后获得的纳米脱钙骨基质浆中，置于液氮中，完成初步冰冻；将获得的冰冻支架放入真空冻干机内，冻干至少48小时，完成表面涂层修饰，获得经纳米脱钙骨基质颗粒涂层修饰的聚己内酯-磷酸三钙骨组织工程支架；

所述同种异体纳米脱钙骨基质材料与75％乙醇的体积比为1:(5～10)；

所述聚己内酯-磷酸三钙骨组织工程支架通过3D打印技术构建；3D打印技术为熔融沉积成型技术；

所述聚己内酯-磷酸三钙骨组织工程支架的制备方法包括以下步骤：

将聚己内酯颗粒与磷酸三钙粉末按照(3～6)：1的质量比例预混合，然后通过转矩流变仪充分均匀混合，再通过切粒机制备成适合3D打印的颗粒状混合材料；

首先利用3D打印机配套的CAD软件设计聚己内酯-磷酸三钙骨组织工程支架模型纤维直径为0.5mm，层高为0.3mm，各层纤维叠加角度为0/90°；再将上述预先制备好的颗粒状混合材料放入熔融池中，设定熔融池进料温度为120℃，出料温度为110℃，颗粒状混合材料在熔融池内保温120分钟以上，确保充分熔融，融化后的材料通过电机助推微注射器式精细喷头挤出纤维，层层叠加形成聚己内酯-磷酸三钙骨组织工程支架；

所述同种异体纳米脱钙骨基质材料的制备方法包括以下步骤：

第一步，制备纳米脱钙骨基质骨块：将新鲜同种异体骨剔除软组织后采用改良Urist法制备块状纳米脱钙骨基质骨块；

第二步，制备纳米脱钙骨基质粉末：将第一步获得的块状纳米脱钙骨基质骨块置入氧化锆纳米研磨罐中，放入氧化锆研磨球，拧紧罐口，将研磨罐置入全自动液氮冷冻研磨仪进行预粉碎，得到粒径为5-10μm的纳米脱钙骨基质粉末；

第三步，制备同种异体纳米脱钙骨基质材料：将第二步获得的纳米脱钙骨基质粉末置入氧化锆纳米研磨罐中，加入氧化锆研磨球，加入75％乙醇至研磨球被完全覆盖，将氧化锆纳米研磨罐置入全自动低温高能球磨仪中球磨，得到粒径为20-50nm的同种异体纳米脱钙骨基质材料；

所述改良Urist法制备块状纳米脱钙骨基质骨块包括以下步骤：

将新鲜同种异体骨剔除软组织后，将同种异体骨处理为大小约1cm×1cm的骨块，精密称重后将同种异体骨块放入-80℃冰箱冻存；

将冻存后的同种异体骨块放入烧杯中，无水乙醇浸泡2h脱水；倒掉无水乙醇，加入乙醚脱脂，浸泡12h；去乙醚，大量无菌蒸馏水冲洗3次；加入配置好的0.6mmol/L盐酸脱钙，浸泡72h，浸泡过程中每12h更换盐酸一次，并使用精密增力电动搅拌器不断搅拌，无菌蒸馏水冲洗5次并浸泡过夜；再次以无水乙醇浸泡2h；去乙醇加入乙醚浸泡1h；倒除乙醚，将骨块放置在通风实验台处挥发过夜；真空冻干机内冻干后包装封存备用，获得块状纳米脱钙骨基质骨块；

所述第三步在全自动低温高能球磨仪中，温度设定为25-35℃，转速1500r/min，研磨时间20min，当研磨罐内温度超过35℃时，球磨仪将自动降低转速至500转/秒，待水冷机将研磨罐温度降至30℃时，球磨仪将自动再次进行高速研磨。

2.根据权利要求1所述的聚己内酯-磷酸三钙骨组织工程支架进行纳米脱钙骨基质颗粒涂层修饰的方法，其特征在于：所述同种异体纳米脱钙骨基质材料与75％乙醇的体积比为1:5。

3.根据权利要求1所述的聚己内酯-磷酸三钙骨组织工程支架进行纳米脱钙骨基质颗粒涂层修饰的方法，其特征在于：所述第二步中，氧化锆纳米研磨罐内使用直径为1.5cm的氧化锆研磨球；

所述第二步中，预粉碎设置参数30次/秒，研磨时间5min。

4.根据权利要求1所述的聚己内酯-磷酸三钙骨组织工程支架进行纳米脱钙骨基质颗粒涂层修饰的方法，其特征在于：所述第三步中，氧化锆纳米研磨罐内使用直径为1mm的氧化锆研磨球。

5.一种权利要求1至4任一项所述制备方法制备的经纳米脱钙骨基质颗粒涂层修饰的聚己内酯-磷酸三钙骨组织工程支架。

6.一种权利要求1至4任一项所述制备方法制备的经纳米脱钙骨基质颗粒涂层修饰的聚己内酯-磷酸三钙骨组织工程支架在制备骨缺损修复材料或骨移植替代物中的应用。