[发明专利]一种微藻油DHA的提取方法

权利要求书

1.一种微藻油DHA的提取方法，包括以下步骤：

1)将微藻培养液进行酶解处理；

2)步骤1)酶解过的培养液，充入氮气，加热培养液离心即得富含DHA的粗品微藻油；

3)对步骤2)得到的粗品微藻油进行精炼纯化，得到DHA微藻精制油。

2.根据权利要求1所述的微藻油DHA的提取方法，其特征在于，所述微藻培养液的微藻含量为50g/L～150g/L。

3.根据权利要求1所述的微藻油DHA的提取方法，其特征在于，所述酶解处理的酶为碱性酶。

4.根据权利要求3所述的微藻油DHA的提取方法，其特征在于，所述碱性酶的酶活为15～20万单位/克。

5.根据权利要求4所述的微藻油DHA的提取方法，其特征在于，所述碱性酶与微藻培养液重量比例为1～1.5：1000。

6.根据权利要求1所述的微藻油DHA的提取方法，其特征在于，所述酶解处理的条件为温度50～60℃，调节pH8～8.5，加入微藻培养液1～1.5/1000的碱性酶，搅拌、酶解8～9小时。

7.根据权利要求1所述的微藻油DHA的提取方法，其特征在于，所述步骤2)中加热方法为使得培养液经过换热器升温达到80～95℃。

8.根据权利要求1所述的微藻油DHA的提取方法，其特征在于，所述培养液离心的转速为5000～8000r/min。

9.根据权利要求1所述的微藻油DHA的提取方法，其特征在于，所述培养液离心的进口液体压力在0.03～0.1MPa，出口压力调节为0.05～0.3MPa。

10.根据权利要求1所述的微藻油DHA的提取方法，其特征在于，所述精炼纯化方法为脱胶、脱酸、脱色、脱臭、冬化、乙酰化、尿素包埋、分子蒸馏处理；

其中，所述脱胶过程为：把固体杂质含小于0.2％的微藻油注入到密闭的精炼罐内，并充入氮气，加热微藻油并搅拌；当油温达到65℃后，加入已配好的同样温度的油重10％的磷酸水溶液(磷酸量为油重的0.1％)，在搅拌速度60r.p.m状态下，10min内加完，再以30r.p.m搅拌速度维持15min，之后保温静止3h，然后放出下层的胶体及水；

所述脱酸过程为：油温加热到65℃，在搅拌速度60r.p.m状态下，边搅拌边加入一定量的70℃、20波美度碱液，15min内加完，再以30r.p.m搅拌速度维持15min，之后，保温静止6h，然后放出下层的皂角及水；

所述水洗过程为：油温加热到65℃，在搅拌速度60r.p.m状态下，边搅拌边加入油重10％的70℃的去离子水，10min内加完，再以30r.p.m搅拌速度维持15min，之后，保温静止6h，然后放出下层的皂角及水；

所述脱色过程为经过脱胶、脱酸的微藻油在脱色罐内，在真空度-0.085MPa，搅拌速度60r.p.m状态下，让油加热到110℃，然后加入油重1.5％的活性炭+2％的白土，搅拌35min，之后，过滤；

所述脱臭过程为：将脱色处理后的微藻油引入到脱臭罐内，真空度维持在200Pa以内，温度加热到220℃，通入230℃干净的过热蒸汽，1h，降温到45℃排出；

所述冬化过程为：在结晶罐内，脱臭油从45℃降到-5℃，需要36h，经过结晶、养晶过程之后，过滤；

所述乙酯化过程为：将微藻冬化油预热至65℃左右，称取油重约0.8％的催化剂(乙醇钠)溶于无水乙醇中，完全溶解后加入到微藻油中，醇油质量比约为1:3，冲入氮气，搅拌70min。然后加入1.5mol/L盐酸，调节PH值至7—8，此时混合液颜色逐渐由棕色变为金黄色，得到粗二十二碳六烯酸乙酯，静置分层，除去下层甘油；

所述尿素包埋过程为：将粗乙酯打入尿素包和罐，加热至70℃，将一定比例的尿素溶于80℃95％乙醇中，之后加入到粗乙酯中，搅拌60min，进行包和。粗乙酯：尿素：乙醇＝1:1.5:3比例进行。包和完成后打入冷冻罐中结晶，温度在-15℃以下，结晶24h。然后打入离心机进行尿素和乙酯的分离，分离出的乙醇乙酯的混合液，浓缩回收乙醇，乙酯打入水洗罐进行水洗。水洗用浓度10％盐水，体积约为混合液的1/4，水洗后下层为盐水，上层为乙酯，水洗三次，放出盐水，将乙酯打入脱水罐，进行真空脱水，然后得到二十二碳六烯酸乙酯半成品；

所述分子蒸馏过程为：将二十二碳六烯酸乙酯在分子蒸馏装置中以蒸馏温度为120℃,压力为200Pa进行脱水处理，获得重组分；将重组分进行二级分子蒸馏，蒸馏温度90℃，压力10Pa，获得重组分；将收集二级的重组分进行三级分子蒸馏，蒸馏温度125℃，压力8Pa，获得重组分及轻组分；将收集三级的重组分进行四级分子蒸馏，蒸馏温度128℃，压力6Pa，获得重组分及轻组分；收集三级、四级分子蒸馏的轻组分，即得到DHA含量80％以上精油。