[发明专利]三十四碳-(20,23)-二烯酸的提取方法及其应用有效
申请号: | 201810951376.9 | 申请日: | 2018-08-21 |
公开(公告)号: | CN109180467B | 公开(公告)日: | 2021-06-25 |
发明(设计)人: | 付雪艳;董琳;郭东燕;陈容 | 申请(专利权)人: | 宁夏泰杰农业科技有限公司 |
主分类号: | C07C57/03 | 分类号: | C07C57/03;A61K31/201;A61P35/00 |
代理公司: | 宁夏合天律师事务所 64103 | 代理人: | 孙彦虎 |
地址: | 751300 宁夏回族自*** | 国省代码: | 宁夏;64 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 三十四 20 23 二烯酸 提取 方法 及其 应用 | ||
本发明公开了三十四碳‑(20,23)‑二烯酸的提取方法,属于医药应用技术领域。包括预处理、提取、浓缩、萃取步骤,其中,在预处理阶段,选用60~100目的银柴胡颗粒,增加提取溶剂与银柴胡的接触面。使用恒温的提取环境,降低物质沸点,提高银柴胡中有效组分的提取效率,提高三十四碳‑(20,23)‑二烯酸得到率。同时,通过定温浓缩及定温萃取,进一步提高三十四碳‑(20,23)‑二烯酸得到率。实验验证,上述方法提取的三十四碳‑(20,23)‑二烯酸在抑制肿瘤细胞生长尤其是在抑制胃癌肿瘤细胞生长中,有着显著的抑制活性,对胃癌肿瘤细胞的抑制率达到50%以上。
技术领域
本发明属于医药应用技术领域,具体涉及三十四碳-(20,23)-二烯酸的提取方法及其应用。
背景技术
文献记载,在银柴胡中能够分离得到三十四碳-(20,23)-二烯酸,然而,对三十四碳-(20,23)-二烯酸的药效以及如何从中药材银柴胡中富集提取三十四碳-(20,23)-二烯酸化合物的研究却鲜有报道,现有技术中,从银柴胡中提取分离三十四碳-(20,23)-二烯酸的过程复杂,耗时耗力,且不能保证最终目标化合物三十四碳-(20,23)-二烯酸的得到率。这极大的限制了银柴胡尤其是银柴胡中有效组分三十四碳-(20,23)-二烯酸在药用领域的发展。
银柴胡为石竹科植物Stellaria dichotoma L.var.lanceolata Bge的干燥根,味甘、微寒,主产于宁夏地区,是宁夏道地药材,目前约有15万亩的种植面积。文献记载银柴胡具有清虚热,除疳热的功能,用于阴虚发热、骨蒸痨热、小儿疳热等症。银柴胡的基础研究始于上世纪六十年代,目前,已从银柴胡中分离鉴定出发现12种甾醇类、18种生物碱类、13种环肽类、17种挥发性物质和5种酚酸类物质。有文献表明,银柴胡在缓解炎症、抗变态反应、抗动脉粥样硬化以及缓解肿瘤细胞恶化方面有着显著的作用。
由于三十四碳-(20,23)-二烯酸含量较少,往往被忽略或者和其他化合物一起被制成混合提取物来研究其医药学性质,这导致在对三十四碳-(20,23)- 二烯酸药用价值研究的缺失,不能清楚的表明银三十四碳-(20,23)-二烯酸在治疗病症时的效果以及其表现出的细胞毒性。分离提纯银柴胡中的三十四碳- (20,23)-二烯酸并研究其药用价值将极大推进银柴胡在中药领域的应用。
发明内容
有鉴于此,本发明公开了一种从银柴胡中提取三十四碳-(20,23)-二烯酸的方法。
本发明还公开了上述方法提供的三十四碳-(20,23)-二烯酸在防治恶性肿瘤中的应用。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案是:
一种从银柴胡中提取所述三十四碳-(20,23)-二烯酸的方法,包括以下步骤:
预处理:清洗中药材银柴胡,并粉碎,筛选其中60目~100目的粉状颗粒;
提取:取中药材银柴胡,投入实验室用多功能提取罐中,按预定药液比加入75%乙醇水溶液,在预定提取温度下,提取3h;
浓缩:将提取产生的粗液过滤后,在预定浓缩温度下蒸发浓缩,至无醇味;
萃取:对浓缩产生的浓缩液用石油醚在预定萃取比和萃取温度下进行萃取,石油醚萃取相浓缩得石油醚部,石油醚萃余相用二氯甲烷在预定萃取比和萃取温度下进行萃取,二氯甲烷萃取相浓缩得二氯甲烷部,二氯甲烷萃余相用乙酸乙酯在预定萃取比和萃取温度下进行萃取,乙酸乙酯萃取相浓缩得乙酸乙酯部,对乙酸乙酯部依次通过常压层析柱、硅胶柱、ODS柱、LH-20凝胶柱色谱及PHPLC 进行分离,除杂后得到三十四碳-(20,23)-二烯酸;
其中,所述步骤“提取”中,预定药液比为1:10,预定提取温度为65℃~ 90℃;
所述步骤“浓缩”中,预定浓缩温度为55℃~70℃;
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