[发明专利]一种玉米自交系SL1303幼胚转化方法有效
申请号: | 201810951406.6 | 申请日: | 2018-08-21 |
公开(公告)号: | CN109042297B | 公开(公告)日: | 2022-04-19 |
发明(设计)人: | 高勇;陈建民;陶海霞;仲雪;张梦娇 | 申请(专利权)人: | 扬州大学 |
主分类号: | A01H1/02 | 分类号: | A01H1/02;A01H4/00 |
代理公司: | 南京纵横知识产权代理有限公司 32224 | 代理人: | 薛海霞;董建林 |
地址: | 225009 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 玉米 自交系 sl1303 转化 方法 | ||
1.一种玉米自交系SL1303幼胚转化方法,其特征在于:包括如下步骤:
(1)愈伤组织诱导:在无菌操作台中剥取幼胚,用镊子将玉米种子固定住,将玉米的胚挑出,沿胚轴纵切成两半,然后将胚的外侧面向上置于愈伤组织诱导培养基上;先在34℃高温下暗培养3天;再放在培养箱25℃,暗培养7天;
(2)继代培养:将诱导产生的愈伤组织切去内生芽,接种至继代培养基中25℃暗培养7天,继代两次,统计产生的胚性愈伤组织;
(3)分化培养:将长出的胚性愈伤组织转入分化培养基中,25℃,光照培养至长芽;
(4)生根培养:待长出完整的再生苗后转入生根培养基中,28℃,每天16小时光照,进行生根壮苗,根长至4-5cm,进行炼苗移栽;
所述的愈伤组织诱导培养基为:MS+30g/L碳源+3g/L凝胶剂+4mg/L 2,4-D+500mg/L酪蛋白氨基酸+500mg/L脯氨酸;
所述的继代培养基为:MS+30g/L碳源+3g/L凝胶剂+4mg/L 2,4-D+500mg/L 酪蛋白氨基酸+500mg/L脯氨酸+0.85mg/L AgNO3;
所述的分化培养基为:N6+60g/L 碳源+3g/L 凝胶剂+0.7g/L脯氨酸+500mg/L 酪蛋白氨基酸+1mg/L KT+10mg/L NAA+1mg/L ZT;
所述的生根培养基为:1/2MS+30g/L 碳源+3g/L 凝胶剂+500mg/L酪蛋白氨基酸+0.5g/L脯氨酸+0.4mg/L IBA;
所述碳源为蔗糖;
所述凝胶剂为植物凝胶。
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