[发明专利]一种玉米自交系SL1303幼胚转化方法有效

专利信息
申请号: 201810951406.6 申请日: 2018-08-21
公开(公告)号: CN109042297B 公开(公告)日: 2022-04-19
发明(设计)人: 高勇;陈建民;陶海霞;仲雪;张梦娇 申请(专利权)人: 扬州大学
主分类号: A01H1/02 分类号: A01H1/02;A01H4/00
代理公司: 南京纵横知识产权代理有限公司 32224 代理人: 薛海霞;董建林
地址: 225009 *** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 玉米 自交系 sl1303 转化 方法
【权利要求书】:

1.一种玉米自交系SL1303幼胚转化方法,其特征在于:包括如下步骤:

(1)愈伤组织诱导:在无菌操作台中剥取幼胚,用镊子将玉米种子固定住,将玉米的胚挑出,沿胚轴纵切成两半,然后将胚的外侧面向上置于愈伤组织诱导培养基上;先在34℃高温下暗培养3天;再放在培养箱25℃,暗培养7天;

(2)继代培养:将诱导产生的愈伤组织切去内生芽,接种至继代培养基中25℃暗培养7天,继代两次,统计产生的胚性愈伤组织;

(3)分化培养:将长出的胚性愈伤组织转入分化培养基中,25℃,光照培养至长芽;

(4)生根培养:待长出完整的再生苗后转入生根培养基中,28℃,每天16小时光照,进行生根壮苗,根长至4-5cm,进行炼苗移栽;

所述的愈伤组织诱导培养基为:MS+30g/L碳源+3g/L凝胶剂+4mg/L 2,4-D+500mg/L酪蛋白氨基酸+500mg/L脯氨酸;

所述的继代培养基为:MS+30g/L碳源+3g/L凝胶剂+4mg/L 2,4-D+500mg/L 酪蛋白氨基酸+500mg/L脯氨酸+0.85mg/L AgNO3

所述的分化培养基为:N6+60g/L 碳源+3g/L 凝胶剂+0.7g/L脯氨酸+500mg/L 酪蛋白氨基酸+1mg/L KT+10mg/L NAA+1mg/L ZT;

所述的生根培养基为:1/2MS+30g/L 碳源+3g/L 凝胶剂+500mg/L酪蛋白氨基酸+0.5g/L脯氨酸+0.4mg/L IBA;

所述碳源为蔗糖;

所述凝胶剂为植物凝胶。

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