[发明专利]一种降解黄曲霉毒素的微生物制剂及应用

说明书

本发明公开了一种降解黄曲霉毒素的微生物制剂及应用，属于黄曲霉毒素脱毒技术领域。本发明降解黄曲霉毒素的微生物制剂的有效成分为暹罗芽孢杆菌菌悬液或暹罗芽孢杆菌全培养液培养物或暹罗芽孢杆菌的粗提物或暹罗芽孢杆菌的胞外代谢物；所述暹罗芽孢杆菌为暹罗芽孢杆菌A2025，于2018年04月12日保藏于：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO:15611，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，请求保藏单位为山东省花生研究所。本发明的暹罗芽孢杆菌A2025对黄曲霉毒素具有高效的降解作用。

技术领域

本发明属于黄曲霉毒素脱毒技术领域，具体涉及一种降解黄曲霉毒素的微生物制剂及应用。

背景技术

黄曲霉毒素(Aflatoxin)是一类主要由黄曲霉(Aspergillusflavus)、寄生曲霉(A.parasiticus)等真菌产生的次级代谢物。从分子结构上分析，该类毒素是由二呋喃环和香豆素组成的结构类似物。曲霉毒素具有极强的致畸、致癌、致突变性，广泛污染花生、玉米、棉籽、稻谷、干果、牛奶等农产品和食品。我国是花生出口大国，每年都有出口花生到日本和欧盟因为黄曲霉毒素超标而导致的退回事件，是影响我国出口花生的主要问题。现在已鉴定出二十多种黄曲霉素素，其中黄曲霉毒素B₁(AFB₁)分布范围最广，并且毒性最强，1993年AFB₁被世界卫生组织癌症研究机构(IARC)归为IA类致癌物。

目前常用的脱除AFB₁方法主要是物理法和化学法。物理法包括有挑拣、漂洗、高温加热、辐射法、溶剂萃取等方法，这些方法或者耗费大量人力物力效率不高，或者会破坏农产品的营养成分，以加热去除为例，AFB₁的热稳定性较高，分解温度为在268℃。化学法是利用一些氧化剂、氢氧化钠等化学试剂与毒素反应造成毒素降低，但有很大的局限性，很多试剂对操作人员的皮肤、眼睛、呼吸道造成伤害，并且化学试剂残留不易去除，影响农产品和食品的质量安全。微生物脱毒法成为近年来的研究热点，该方法主要是利用细菌、真菌等微生物及其代谢产物去除食品中污染的AFB₁，该脱毒法对原料无污染、具有高度专一性、同时避免毒素重新产生，降解条件温和、特异性强和脱毒效率高等优点，因此是一种高效、安全的去毒方法。微生物不同，脱毒效率明显不同，很多微生物能去除的AFB₁效率低，需要寻找脱毒效率高的菌株。

发明内容

针对现有技术中存在的问题，本发明的目的在于提供一种降解黄曲霉毒素的微生物制剂以及使用该微生物制剂对于黄曲霉毒素污染的农产品脱毒的方法。

为了达到上述目的，本发明的技术方案为：

一种降解黄曲霉毒素的微生物制剂，其有效成分为暹罗芽孢杆菌菌悬液或暹罗芽孢杆菌全培养液培养物或暹罗芽孢杆菌的粗提物或暹罗芽孢杆菌的胞外代谢物；

所述暹罗芽孢杆菌为暹罗芽孢杆菌(Bacillussiamensis)A2025，于2018年04月12日保藏于：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNO:15611，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，请求保藏单位为山东省花生研究所。

在上述方案的基础上，暹罗芽孢杆菌A2025全培养液培养物的制备方法为：

取50μL冻存暹罗芽孢杆菌A2025菌液接种到装有5mL的LB液体培养基试管中，培养12h活化菌株，向100mL LB液体培养基中接入活化的500μL菌液，在37℃震荡发酵培养48h，菌液浓度为1.6×10⁸cfu/mL。

在上述方案的基础上，暹罗芽孢杆菌A2025菌悬液的制备方法为：