[发明专利]液基细胞保存液及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种液基细胞保存液及其制备方法和应用，涉及生物技术领域。本发明提供的液基细胞保存液，按重量份数计包括以下组分：固定剂12‑18份，抗凝剂2‑8份，缓冲剂2‑10份，离子强度维持剂0.5‑0.85份，抗微生物试剂2‑8份，粘液溶解剂0.05‑0.2份和清洁剂0.1‑0.4份。该液基细胞保存液具有保存细胞稳定性高、细胞固定良好、成本低和保留细胞形态更完整等优点。此外，本发明还提供了液基细胞保存液的制备方法和其在保存人体脱落细胞中的应用。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体而言，涉及一种液基细胞保存液及其制备方法和应用。

背景技术

宫颈癌的发病率居女性生殖道恶性肿瘤的首位。全球每年有近50万宫颈癌新发病例，其中83％发生在发展中国家，我国年新发病例13.15万，占28.8％。全世界每年约有29万人死于宫颈癌，我国约有3万人。因此，宫颈癌防治已成为全球性的公共卫生问题。

液基薄层细胞检测(Thin-Cytologic Test，TCT)是采用液基薄层细胞检测系统来检测宫颈细胞并进行细胞学的分类诊断，它是目前国际上较先进的一种宫颈癌细胞学检查技术，与传统的宫颈刮片巴氏涂片检查相比，TCT明显提高了标本的满意度及宫颈异常细胞检出率。TCT从根本上解决了常规脱落细胞制片假阴性率高、丢失细胞率高(80％)和涂片质量差等技术难题，使宫颈癌的阳性检出率达95％以上，为脱落细胞学诊断作出了重大贡献。

过去TCT需要应用国外的制片机和细胞保存液，由于价格昂贵，在国内也只能是一些大医院才能开展该项目，在基层医院的推广则比较缓慢。后来国内的一些厂家研发了半自动的离心法制片机，并自主研发了细胞保存液，降低了薄层液基细胞的制片成本。但目前国内研发的细胞保存液往往存在性能不稳定，保存效果不佳等问题，市场占有率不高。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种液基细胞保存液，它具有保存细胞稳定性高、细胞固定良好、成本低和保留细胞形态更完整等优点，而且还能够选择性消除红细胞，抑制白细胞，有效杀灭微生物，破坏逆转录酶活性，保留待检细胞核酸和蛋白质完整结构，便于分析，从而提高TCT的筛查灵敏度和特异性。

本发明的第二目的在于提供一种液基细胞保存液的制备方法，该制备方法操作简单，便于工业化生产。

本发明的第三目的在于提供液基细胞保存液在保存人体脱落细胞中的应用。

为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：

第一方面，本发明提供了一种液基细胞保存液，按重量份数计包括以下组分：固定剂12-18份，抗凝剂2-8份，缓冲剂2-10份，离子强度维持剂0.5-0.85份，抗微生物试剂2-8份，粘液溶解剂0.05-0.2份和清洁剂0.1-0.4份。

进一步，在本发明提供的技术方案的基础上，按重量份数计包括以下组分：固定剂13-17份，抗凝剂3-7份，缓冲剂3-7份，离子强度维持剂0.5-0.75份，抗微生物试剂3-7份，粘液溶解剂0.06-0.15份和清洁剂0.15-0.3份。

进一步，在本发明提供的技术方案的基础上，按重量份数计包括以下组分：固定剂14-16份，抗凝剂4-6份，缓冲剂4-6份，离子强度维持剂0.55-0.65份，抗微生物试剂4-6份，粘液溶解剂0.08-0.11份和清洁剂0.18-0.22份。

进一步，在本发明提供的技术方案的基础上，所述固定剂包括乙醇、甲醛或戊二醛中的一种或多种，优选乙醇；

优选地，所述抗凝剂包括乙二胺四乙酸二钠、柠檬酸钠或乙二胺四乙酸二钾中的一种或多种，优选乙二胺四乙酸二钠。

进一步，在本发明提供的技术方案的基础上，所述缓冲剂包括醋酸钠、磷酸氢二钠或磷酸二氢钠中的一种或多种，优选醋酸钠；