[发明专利]一种快速评价柑橘溃疡病药剂药效的方法

说明书

本发明属于柑橘病害防治技术领域，尤其是一种快速评价柑橘溃疡病药剂药效的方法。一种快速评价柑橘溃疡病药剂药效的方法，包括如下步骤：(1)接种用主要器具准备；(2)柑橘溃疡病病叶采集；(3)柑橘健康离体叶片采集；(4)溃疡病叶片处置；(5)离体叶片处置；(6)接种病菌；(7)接种后药剂处置和(8)药剂后处置。本发明的方法所用器具简单，无高难度技术操作，简单易行；跳过细菌液准备阶段，缩短病菌接种时间，占用空间小；发病症状同田间症状一致，易识别，药剂防治效果差异显著，接种发病条件容易控制，容易实现技术方法的标准化。

技术领域

本发明属于柑橘病害防治技术领域，尤其是一种快速评价柑橘溃疡病药剂药效的方法。

背景技术

在柑橘病虫害防治领域的农药药效试验中，除了田间喷洒预防实验之外，由于相对环境较好控制，实验室中模拟病害发生的方法也广泛应用，相关研究均需要人工接种发病这一基本手段。而病害人工发病的方法可以选择活体接种或离体接种，其中活体接种的优点是更能反映病菌发病的本貌，缺点是试验周期长，占用较多空间和资源，常处于多因子环境中，局部条件控制较困难；离体接种则可以节省时间，节约资源，实施难度减小，提高试验规模和效率。许多研究结果也表明，离体接种结果和活体接种是一致的，因此植物病虫害的相关研究均采用离体接种方式进行。

柑橘溃疡病是一种危害性很大的细菌性病害，已被多国和地区列为检疫对象，其特点是传染性强，传染途径多样，病害发生后影响树体生长，严重的降低果实商品率，影响柑橘产业发展。

一般植物病虫害防治药剂的筛选评价，通常采用大田喷药试验和实验室接种试验，大田试验通常对植株进行药剂处理，和CK株发病率做比较，以评价药效，实验室方法如管碟法比较药剂所产生的抑菌圈评价药剂对病菌的抑制作用。近年来，柑橘产业蓬勃发展，其中不乏对柑橘溃疡病敏感的品种大量种植和推广，柑橘溃疡病的防治也刻不容缓，而由于柑橘种植企业、个人的种植栽培技术和经验良莠不齐，给其防治带来较大困难。除了传统防治柑橘溃疡病的铜制剂、抗生素、乙蒜素之外，市场上也充斥着大量新型柑橘溃疡病防治药剂，要评价该类药剂是否有效，传统药剂筛选，大田试验周期过长，效率低，环境复杂，条件难以控制；而实验室药剂筛选的具体操作需要较好植物学、微生物学知识背景为基础。要达到简化操作的目的，使更多普通种植者能自行检验并实际操作，急需开发一种新的快速检测方法。

公开于该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不应当被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明的目的是提供一种快速评价柑橘溃疡病药剂药效的方法。

本发明是通过以下技术方案来实现的：

一种快速评价柑橘溃疡病药剂药效的方法，包括以下步骤：

(1)接种用器具的准备：用接种针、消毒剪刀、研钵、灭菌滤纸、溃疡病防治药剂和普通培养皿做接种用器具，培养皿规格视不同品种柑橘叶片大小而定，清洁消毒后备用；

(2)柑橘溃疡病叶采集：选取明显溃疡病病症特征的叶片作为菌种来源，叶片发病病症特点是病灶部位周围有明显黄色菌圈，发病中期时病灶中心为木栓化，呈火山口开裂状；

(3)柑橘健康离体叶片采集：选用叶片为本次梢期所生叶面积已展开至最大，颜色转绿的新叶，用消毒剪刀剪取与步骤(1)中相应培养皿规格大小近似的叶片作为供试材料；

(4)溃疡病叶片的处置：将步骤(2)准备的溃疡病叶片表面进行清洗，采用75％酒精进行简单消毒，用消毒剪刀将叶片上病斑延菌圈分界处剪下，去掉中间木栓化病灶部，减少杂菌侵入，将剪下的菌圈叶片组织放入研钵，加入5mL无菌水，进行研磨后静置5min，吸取上清菌液，备用；