[发明专利]蓖麻毒素B的制备及其应用

说明书

本发明公开了一种蓖麻毒素B的制备及其应用，涉及抗糖尿病药物的技术领域，具体为一种用于治疗2型糖尿病的重组蛋白药物，其能降低2型糖尿病大鼠的血糖和血脂，可以开发成治疗2型糖尿病的药物。

技术领域

本发明涉及抗糖尿病蛋白药物技术领域，具体为一种用于对2型糖尿病的重组蓖麻毒素B链蛋白突变体。

背景技术

糖尿病是一种因胰岛素分泌不足和或胰岛素抵抗而引起的糖、脂肪和蛋白质代谢紊乱的免疫系统疾病，涉及全身各个系统，甚至可诱发许多致命性并发症，严重危害人类健康，糖尿病已经成为当前危害人类健康的第三大疾病。90％以上的糖尿病患者为2型糖尿病(type 2diabetes mellitus，T2DM)。目前，全世界约有2.46亿人患有T2DM，预计在20年内T2DM患者数目将增至3.8亿。中国是全球糖尿病患者人数最多的国家，但中国T2DM患者的血糖达标率严重不足。现阶段治疗T2DM的药物主要为传统抗糖尿病药物，包括：磺酰脲类、格列奈类、双胍类、噻唑烷二酮、α-葡萄糖苷酶抑制剂及胰岛素等，但这些药物均存在不同程度的不良反应，如引发低血糖、胃肠道不适、肥胖等。因而开发更优良的糖尿病治疗新药显得尤为必要，随着对糖尿病基础理论研究的不断深入，抗糖尿病新药的开发成为国内外研究的热点。许多制药公司正在开发新的抗糖尿病药物，以满足目前的糖尿病治疗需求。

由于糖尿病复杂的发病机制，使得医学工作者在药物研发的过程中，逐渐发现了许多潜在的抗糖尿病疗法的新型目标。与此同时，据统计，2013至今进入Ⅲ期临床试验或递交NDA/BLA或获得批准用于治疗糖尿病的药物有65种，分为非胰岛素类抗糖尿病药(41种，包括用于治疗糖尿病相关疾病的药物10种，占63.1％)、胰岛素类药(8种，12.3％)和复方制剂(16种，24.6％)。这些数据表明，国际制药公司将开发糖尿病新药的重点集中在非胰岛素类抗糖尿病药物上，本发明重组蓖麻毒素B链蛋白在一定程度上契合国际药物开发的需求，应用前景广阔。

蓖麻毒素(Ricin)是一种由A链(RTA)和B链(RTB)两条链通过二硫键连接的异源二聚体糖蛋白。其中，RTA是一种在哺乳动物细胞内可抑制蛋白质合成的核糖体灭活蛋白。RTB是一个两叶形结构的分子，由两个相同折叠的拓扑学球状结构域构成，每一个区域又包括三个亚区(ɑ，β，γ)，只有1ɑ和2β有明显的半乳糖结合活性，无毒，具有凝集素活性，可协助A链进入细胞内发挥生物学功能。RTB可以结合不同的糖结构，调节各种生物过程，包括细胞与宿主、病原体相互作用和先天免疫反应。

目前，通过国内外公开出版物的检索并未发现重组蓖麻毒素B链蛋白突变体治疗2型糖尿病以及并发症的相关报道。

发明内容

为了解决目前治疗2型糖尿病药物效果不理想，副作用较多的问题，本发明提供一种重组蓖麻毒素B链蛋白突变体及其表达方法，并验证其对2型糖尿病大鼠的降糖效果。

本发明的技术方案为：

包含SEQ ID：1序列的蛋白在制备治疗2型糖尿病药物中的应用。

包含SEQ ID：1序列的蛋白的插入、删除、替换等突变体在制备治疗2型糖尿病药物中的应用。

所述SEQ ID：1蛋白序列的编码核苷酸为SEQ ID：2。

SEQ ID：1序列的蛋白可降低2型糖尿病模型的大鼠空腹血糖水平。

SEQ ID：1序列的蛋白可降低2型糖尿病模型的大鼠糖化血红蛋白水平。

SEQ ID：1序列的蛋白可降低2型糖尿病模型的大鼠的饮水量。

SEQ ID：1序列的蛋白可增加2型糖尿病模型的大鼠的体重，改善消瘦症状。

SEQ ID：1序列的蛋白可改善2型糖尿病模型的大鼠的甘油三酯(TG)和总胆固醇(TCH)水平。