[发明专利]一种测定蜂胶中氯霉素残留量的方法

权利要求书

1.一种测定蜂胶中氯霉素残留量的方法，其特征在于，以蜂胶原料或蜂胶乙醇提取物为样品，以氢氧化钠溶液为蜂胶溶解液进行溶解，高氯酸为蜂胶沉淀剂进行分散、以氢氧化钠溶液为碱化剂进行除杂质；乙酸乙酯为萃取液对样品进行处理，采用氯霉素免疫胶体金快速检测试剂板通过平行测定进行测定。

2.根据权利要求1所述的测定蜂胶中氯霉素残留量的方法，其特征在于，所述蜂胶溶解液的配制方法为：取分析纯氢氧化钠5g加水90g搅拌溶解混合，冷却后定容到100mL；所述蜂胶沉淀剂的配制方法为：取分析纯高氯酸10mL加水40mL混合溶解；所述碱化剂的配制方法为：取分析纯氢氧化钠40g加水50g于玻璃烧杯中搅拌溶解混合，冷却后定容到100mL。

3.根据权利要求2所述的测定蜂胶中氯霉素残留量的方法，其特征在于，样品的处理工序为：向50mL塑料离心管中加入8mL蜂胶溶解液和8mL水，混合均匀，称入蜂胶原料4g或蜂胶乙醇提取物称取3g，拧紧瓶盖，在掌心上轻轻拍打，使用蜂胶溶解5min，加入蜂胶沉淀剂，用手不停用力震荡1min，使蜂胶分散；将样液倒入定性滤纸中过滤于50mL带刻度的塑料离心管中，取全部滤液；用1mL一次性滴管向滤液加入0.25mL碱化剂，混合均匀，加入16mL乙酸乙酯，充分振荡1min，静置2～5min使乙酸乙酯分层，用3mL一次性滴管吸出上层液体于90cm蒸发皿中，用电吹风机吹干，用1mL一次性滴管加入5滴复溶液，并用1mL一次性滴管反复吹吸蒸发皿上的残渣，直到全部溶解；得到样品处理溶液；

检测测定工序为：取出氯霉素免疫胶体金快速检测试剂板，恢复至室温，置于水平台面上；吸取全部样品处理溶液，加至氯霉素免疫胶体金快速检测试剂板的加样孔中，在5min～10min内目测读取结果，得到检测线(T线)；

空白对照：每批样品需做一孔空白对照，以氯霉素复溶液代替样品处理溶液，按检测测定工序进行，读出空白对照结果，得到控制线(C线)；

根据检测线(T线)和控制线(C线)进行结果判定工序。

4.根据权利要求3所述的一种蜂胶中氯霉素的快速筛选检测方法，其特征在于，所述的结果判定工序分为氯霉素免疫胶体金快速检测试剂板有效性判定和检测结果判定；

所述的氯霉素免疫胶体金快速检测试剂板有效性判定：空白对照控制线(C线)不出现红色条带，则检测试剂板失效，不能进行检测结果判定；空白对照控制线(C线)和检测线(T线)均出现红色条带，而且T线比C线颜色深或一样深，则检测试剂板有效，可进行测结果判定。

所述的检测结果判定：阴性：试样检测线(T线)出现红色条带，且颜色比控制线(C线)深或一样深，结果为阴性即蜂胶原料氯霉素残留量<0.3μg/kg或蜂胶乙醇提取物氯霉素残留量<0.6μg/kg；

阳性：试样检测线(T线)出现红色条带，但颜色比控制线(C线)浅或检测线(T线)未出现红色条带，结果为阳性即蜂胶原料氯霉素残留量≥0.3μg/kg或蜂胶乙醇提取物≥0.6μg/kg。

5.根据权利要求1所述的一种蜂胶中氯霉素的快速筛选检测方法，其特征是，所述平行测定为每个样品的平行样数量≥2，各自按依次进行的样品处理工序、检测测定工序和结果判定工序进行检测。

6.根据权利要求2所述的一种蜂胶中氯霉素的快速筛选检测方法，其特征是，所述水为娃哈哈纯净水或同品质水。

7.根据权利要求3所述的一种蜂胶中氯霉素的快速筛选检测方法，其特征是，所述定性滤纸为11cm定性滤纸。

8.根据权利要求1所述的一种蜂胶中氯霉素的快速筛选检测方法，其特征是，所述蜂胶原料在样品处理工序前需要粉碎细化，当蜂胶含量低于30％时，蜂胶原料用榨汁杯粉碎，当蜂胶含量大于30％时，原料呈结实的块状，需要冷藏后用榔头进行粗粉碎后再用榨汁杯粉碎，倒出蜂胶粉碎物，取其中较细的部分称量检测。