[发明专利]一种利用鸡蛋清生产溶菌酶晶体的方法

权利要求书

1.一种利用鸡蛋清生产溶菌酶晶体的方法，其特征在于：

a)原辅料配比：取相等重量的鸡蛋清和井水；

b)按上述配比配料，将鸡蛋清和井水加入到搅拌器中，200～300rpm下搅拌20min，至稠度均匀即可，然后用纱布过滤，以除去残余蛋壳和少量蛋黄；

c)将b)中搅拌好的料倒入经乙酸水溶液泡过的搪瓷容器内，再加入724树脂，放置2h以上，然后将弃去上清液，将724树脂用清水反复冲洗3次，晾干后移入下一个搪瓷容器；

d)在c)所得的724树脂内加入1％～5％质量浓度的磷酸盐，搅拌洗脱30min后加等质量浓度的硫酸铵溶液，使溶菌酶与蛋清完全分离，再加水1kg，升温至40～50℃，保持15min，然后降温至5～8℃，滤出洗脱液至下一个搪瓷容器；

e)将步骤d)中所得的洗脱液加入硫酸铵溶液和氯化钠，放置2h以上，以使溶菌酶从洗脱液中析出来；

f)将步骤e)中所得的洗脱液中加入纯碱调pH值至10，再加入10％～15％质量浓度的聚丙烯酸，在5～8℃下放置一周；

g)将步骤f)中沉淀出来的晶体晾干，获得溶菌酶晶体成品，于5～8℃下储存。

2.一种利用鸡蛋清生产溶菌酶晶体的方法，其特征在于：

1)材料选择与预处理：

a)树脂：500g724树脂用氢氧化钠溶液50g浸泡1-2小时，然后用蒸馏水冲洗至pH14；再用pH6.5的磷酸盐缓冲液浸泡8小时；所述的磷酸盐缓冲液配制方法为：取磷酸二氢钠8g，磷酸氢二钠18g,加水搅溶，测的pH值为6.5，即为磷酸盐缓冲液；

b)聚丙烯酸：用少许磷酸盐缓冲液溶解分析纯为38％的聚丙烯酸；

c)选择土陶罐、陶瓷或搪瓷容器；

2)吸附：取1000g鸡蛋清兑1000g蒸馏水，加入预处理后的724树脂，慢慢搅拌半小时至均匀，升温到70℃，保持10-20分钟，冷却；

3)洗脱：在冷却后的吸附有溶菌酶的树脂中加入适量的32％硫酸铵粉末，搅拌半小时至均匀，加入硫酸铵溶液的量以使pH值达到6.0-6.5之间为度，升温到50℃，保持10-15分钟，冷却；

4)盐析：在前一步冷却后的洗脱液中加入适量的10％的硫酸铵溶液，搅拌半小时至均匀，加入硫酸铵溶液的量以使pH值达到6.0-6.5之间为度，然后用滤布过滤去渣，盐析物待用；

5)结晶：将前一步获得的盐析物升温至40℃，将预处理后的聚丙烯酸溶液逐渐渗入，一边渗入一边轻轻搅动，加入聚丙烯酸溶液的量以达到溶菌酶与蒸馏水分汁为度，然后冷却至0℃，结晶完成，取出晶块，破碎装瓶。