[发明专利]一种人的V型质子ATP酶亚基F突变蛋白及其应用

说明书

本发明涉及一种人的V型质子ATP酶亚基F突变蛋白及其应用，通过将大量肺癌患者作为研究病例，对病例进行基因检测并分析，确定出人的V型质子ATP酶亚基F的突变蛋白，根据该人的V型质子ATP酶亚基F的突变蛋白制备基因芯片、单克隆抗体和ELISA试剂盒，为肺癌的基因诊断提供指引作用，并为相关疾病的诊断和治疗提供一定的理论基础。

技术领域

本发明涉及一种基因工程领域，尤其涉及一种人的V型质子ATP酶亚基F突变蛋白及其应用。

背景技术

V型质子ATP酶(V-type proton ATPase,V-ATPase)是使用能量从ATP水解以产生质子梯度的质子泵，它在真核生物中行使者非常广泛的功能，不仅对一系列细胞器具有酸化作用，而且可以将电子泵过多种细胞的细胞质膜。在细胞内吞作用及细胞内物质转运过程中，V型质子ATP酶都起着非常重要的作用。

人的V型质子ATP酶发生突变会对人类健康造成严重影响。在对大量肺癌患者的外周血进行基因测序的过程中，均发现患者的V型质子ATP酶亚基F发生了突变，因此，对人的V型质子ATP酶亚基F突变的检测对判断人体是否患有相关疾病具有一定的指引作用。

发明内容

本发明目的在于提供一种人的一种人的V型质子ATP酶亚基F突变蛋白及其应用。

本发明技术方案包括：

第一方面，提供一种人的V型质子ATP酶亚基F突变蛋白，其氨基酸序列如SEQ IDNO:1所示。

第二方面，提供一种人的V型质子ATP酶亚基F突变蛋白的编码基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。

第三方面，提供一种基因芯片，包括：固相载体和固定在该载体上的核苷酸探针；所述核苷酸探针根据上述所述人的V型质子ATP酶亚基F突变蛋白的核苷酸序列，与人的V型质子ATP酶亚基F正常蛋白的核苷酸序列的比对结果确定。

优选地，所述核苷酸探针为SEQ ID NO:3所示的碱基序列；

或，所述核苷酸探针为SEQ ID NO:4所示的碱基序列；

或，所述核苷酸探针为SEQ ID NO:5所示的碱基序列。

第四方面，提供一种试剂，所述试剂中含有用于检测上述人的V型质子ATP酶亚基F突变蛋白的引物对。

优选地，其所述引物对包括下述任一上游引物与下述任一下游引物的组合：上游引物为如SEQ ID NO:8～NO:11中任一所示的碱基序列；下游引物为如SEQ ID NO:15～NO:17、SEQ ID NO:20～NO:32中任一所示的碱基序列；

或，

其所述引物对包括下述任一上游引物与下述任一下游引物的组合：上游引物为如SEQ ID NO:8～NO:14中任一所示的碱基序列；下游引物为如SEQ ID NO:20～NO:32中任一所示的碱基序列。

或，

其所述引物对包括下述任一上游引物与下述任一下游引物的组合：上游引物为如SEQ ID NO:8～NO:14、SEQ ID NO:18～NO:19中任一所示的碱基序列；下游引物为如SEQ IDNO:22～NO:32中任一所示的碱基序列。

第五方面，提供一种特异性识别人的V型质子ATP酶亚基F突变蛋白的单克隆抗体，由上述试剂制备而成，其可与SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列特异性结合。

第六方面，提供一种用于检测人的V型质子ATP酶亚基F突变蛋白的抗体的ELISA试剂盒，所述ELISA试剂盒包括：包被有上述单克隆抗体的ELISA酶标板、酶标二抗、检测对象的V型质子ATP酶亚基F、样品稀释液、包被缓冲液、ELISA酶标板洗涤液、显色液和终止液。