[发明专利]重组融合细胞因子IL-7-Linker-IL-15腺病毒及其构建和应用在审
| 申请号： | 201810963640.0 | 申请日： | 2018-08-23 |
| 公开（公告）号： | CN109022376A | 公开（公告）日： | 2018-12-18 |
| 发明（设计）人： | 祝秉东;白春香;何娟娟;吕薇;唐君霞;周利军;韩江媛;牛红霞 | 申请（专利权）人： | 兰州大学 |
| 主分类号： | C12N7/01 | 分类号： | C12N7/01;C12N15/861;A61K39/39;A61K39/04;A61P31/06 |
| 代理公司： | 兰州智和专利代理事务所(普通合伙) 62201 | 代理人： | 张英荷 |
| 地址： | 730000 甘肃*** | 国省代码： | 甘肃;62 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 腺病毒 构建 融合细胞 结核亚单位疫苗 记忆性T细胞 免疫保护作用 骨架载体 基因克隆 免疫应答 疫苗免疫 疫苗诱导 共转染 介导 佐剂 应用 分化 调控 | ||
1.重组融合细胞因子IL-7-Linker-IL-15腺病毒，其特征在于：重组融合细胞因子IL-7-Linker-IL-15的基因序列如下：
。
2.如权利要求1所述一种重组融合细胞因子IL-7-Linker-IL-15腺病毒的构建方法，首先构建了pDC316-IL-7-Linker载体；然后PCR扩增IL-15基因片段，将IL-15基因片段通过限制性内切酶酶切和连接酶连接的方法连接到pDC316-IL-7-Linker中，构建成pDC316-IL-7-Linker-IL-15；最后将pDC316-IL-7-Linker-IL-15和骨架载体pBHGlox△E1、3Cre转染HEK293细胞并进行包装，通过验证并将包装成功，得到重组融合细胞因子IL-7-Linker-IL-15的腺病毒；其中Linker为(GGGS)3。
3.如权利要求2所述一种重组融合细胞因子IL-7-Linker-IL-15腺病毒的构建方法，其特征在于： pDC316-IL-7-Linker的载体构建，是以pUC57-IL-7-Linker质粒为载体，采用上游、下游两条引物，PCR扩增出IL-7-Linker基因产物；该PCR产物经纯化后，用
4.如权利要求3所述一种重组融合细胞因子IL-7-Linker-IL-15腺病毒的构建方法，其特征在于：所述上游引物为：5’-3’GA
5.如权利要求2所述一种重组融合细胞因子IL-7-Linker-IL-15腺病毒的构建方法，其特征在于：所述重组基因载体pDC316- IL-7-Linker-IL-15的构建，是以pUC57-IL-15质粒为载体，采用上游、下游两条引物，PCR扩增出IL-15基因产物；该PCR产物经纯化后，用
6.如权利要求5所述一种重组融合细胞因子IL-7-Linker-IL-15腺病毒的构建方法，其特征在于：所述上游引物为：5’-3’ CCC
7.如权利要求1所述重组融合细胞因子IL-7-Linker-IL-15腺病毒作为细胞免疫佐剂的应用。
8.如权利要求7所述重组融合细胞因子IL-7-Linker-IL-15腺病毒作为细胞免疫佐剂的应用，其特征在于：所述细胞免疫为结核亚单位疫苗诱导的细胞免疫应答。
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