[发明专利]一种香芋茎尖快繁脱毒的方法

说明书

本发明涉及蔬菜脱毒繁殖技术领域，具体是一种茎尖快繁脱毒的方法，包括以下步骤：(1)外植体的选择与消毒：选取健壮的匍匐茎或植株个体，将取得的材料种在混合基质中，用内吸性杀菌剂进行浇灌，10‑30天后取顶芽，用75％酒精处理10S,再用10％升汞处理20min，然后用无菌水冲洗3‑4次，在超净工作台上的解剖镜下进行顶芽剥离，选取顶芽的茎尖作为备用或者直接使用消毒后的顶芽备用；(2)培养基的筛选：采用MS培养基，添加细胞分裂素，植物生长激素和杀菌剂；本发明通过对外植体的灭菌、组培中分阶段培养基及激素的选择，建立一种香芋茎尖快繁脱毒的方法，为香芋脱毒组培苗工厂化生产提供理论依据和技术支持，进一步促进香芋产业的发展。

技术领域

本发明涉及蔬菜脱毒繁殖技术领域，具体是一种茎尖快繁脱毒的方法。

背景技术

江永县是全国580个蔬菜产业重点县之一，香芋是久负盛名的传统出口特色蔬菜。香芋产业是江永县农业的优势产业，是农民致富的支柱性产业之一，2002年江永县被国家认定为“中国香芋之乡”，江永香芋2008年获得国家农产品地理标志，2009年被国家工商总局批准注册为地理标志证明商标，2012年获得绿色食品认证，产业优势明显。大力发展香芋产业，是充分发挥江永县自然资源优势，优化农业产业结构，加快农业产业化进程，帮助农民致富奔小康的重要途径，做好香芋产业发展工作意义重大。

2013年，香芋种植面积3.8万亩、产量7.5万吨，分别占全县蔬菜总面积的18.59％、蔬菜总产量的15.72％。源口、桃川、夏层铺、允山、千家峒、上江圩等乡镇组成的“香芋生产带”布局框架基本形成；初步建立了“政府引导、龙头带动、业主参与、农民主体”的发展机制，农民种植香芋的积极性高涨，发展香芋产业对调整农业结构、增加农民收入、繁荣农村经济发挥着越来越重要的作用。但是，江永县香芋产业发展仍然面临较为严峻的形势，存在着不少困难和问题。品种退化渐显，品种更新滞后，育苗集约化缺失，连作障碍没有突破，科技创新不足；基础设施配套不完善，农民自我投入能力弱，水、渠、路不适应标准化生产要求；香芋基地建设不规范，香芋培管不到位，产量较低、质量不一等问题较突出，其中进一步加大香芋品种提纯、复壮、选育力度，促进现代生物技术和常规技术有机结合，加强种质资源创新，改进育种方法，培育一批优质、抗病、高产、抗逆性强的香芋优良品种十分迫切。

发明内容

针对江永县香芋产业出现的以上问题，为快速培育一批优质、抗病、高产、抗逆性强的香芋优良品种，且为香芋脱毒组培苗工厂化生产提供理论依据和技术支持，进一步促进香芋产业的发展。现提出一种香芋茎尖快繁脱毒的方法，包括以下步骤：

(1)外植体的选择与消毒：所述外植体包括顶芽或者茎尖，

所述顶芽消毒方式为：选取健壮的匍匐茎或植株个体，将取得的材料种在混合基质中，用内吸性杀菌剂进行浇灌，10-30天后取顶芽，用75％酒精处理10S,再用10％升汞处理20min，然后用无菌水冲洗3-4次，得到备用顶芽；

所述茎尖的消毒方法为：将上述消毒后的顶芽在超净工作台上的解剖镜下进行顶芽剥离，得到备用茎尖；

(2)培养基的筛选：采用MS培养基：pH5.8,琼脂粉用量6.5g/L，蔗糖30g/L，活性炭1.5g/L，添加细胞分裂素，植物生长激素和杀菌剂；

所述顶芽培养基为：MS+6-BA1.0-5.0mg/L+NAA 0.1-0.5mg/L+山农1号1mL/L；

所述茎尖初代培养基为：MS+6-BA4.0mg/L+NAA 0.1mg/L+山农1号1mL/L；

所述茎尖继代培养基为：MS+6-BA4.0mg/L+NAA 0.5mg/L+山农1号1mL/L。

进一步的，所述步骤(1)中的混合基质，按质量比计算，由珍珠岩5份、育苗基质3份、细沙1份组成。