[发明专利]提高米尔贝霉素A3/A4或其衍生物产量的方法

权利要求书

1.一种提高米尔贝霉素A3/A4或其衍生物的产量的方法，其特征在于，所述方法包括：在米尔贝霉素A3/A4或其衍生物的生产菌中，引入：

(1) A1基因簇的milA1基因，所述的A1基因簇的核苷酸序列如SEQ ID NO: 1所示或其互补序列；和

(2) A2-R基因簇或其变体，所述变体中milF基因被敲除；所述的A2-R基因簇为milA2、milC、milE、milA4、sbi_00730、milF、sbi_00732、milA3和milR基因，所述的A2-R基因簇的核苷酸序列如SEQ ID NO: 2所示或其互补序列；

所述米尔贝霉素A3/A4的衍生物为5-酮-米尔贝霉素A3/A4；所述生产菌为链霉菌(Streptomyces)。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，将(1)和(2)同时转入到米尔贝霉素A3/A4或其衍生物的生产菌中。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，分别获取(1)和(2)的两种基因簇、分别转入到米尔贝霉素A3/A4或其衍生物的生产菌中，之后通过接合转移的方式，获得同时携带(1)和(2)的两种基因簇的生产菌。

4. 如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的链霉菌为吸水链霉菌(Streptomyces hygroscopicus)。

5. 如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的(1)和(2)整合到米尔贝霉素A3/A4或其衍生物的生产菌的ΦBT1 attB和ΦC31 attB位点。

6. 一种遗传工程化的米尔贝霉素A3/A4或其衍生物的生产菌在生产米尔贝霉素A3/A4或其衍生物中的用途，其特征在于，该菌株为链霉菌，其中引入了：

(1) A1基因簇的milA1基因，所述的A1基因簇的核苷酸序列如SEQ ID NO: 1所示或其互补序列；和

(2) A2-R基因簇或其变体，所述变体中milF基因被敲除；所述的A2-R基因簇包括milA2、milC、milE、milA4、sbi_00730、milF、sbi_00732、milA3、milR基因，所述的A2-R基因簇的核苷酸序列如SEQ ID NO: 2所示或其互补序列；

所述米尔贝霉素A3/A4的衍生物为5-酮-米尔贝霉素A3/A4。

7.如权利要求6所述的遗传工程化的米尔贝霉素A3/A4或其衍生物的生产菌的用途，其特征在于，所述的米尔贝霉素A3/A4或其衍生物的生产菌为吸水链霉菌(

Streptomyces hygroscopicus)。