[发明专利]用于检测有机磷和氨基甲酸酯类农药含量的凝胶及其应用

说明书

本发明公开了一种用于有机磷和氨基甲酸酯类农药含量的凝胶，包括聚乙烯醇、壳聚糖乙酸溶液、质量浓度为37％的甲醛、活力为0.2U/ml的胆碱酯酶溶液；本发明利用胆碱酯酶催化靛酚乙酸酯水解为乙酸与靛酚、以及有机磷或氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶有抑制作用的原理，通过聚乙烯醇(PVA)、乙酸、壳聚糖(CS)、甲醛、乙酰胆碱酯酶制作含酶凝胶，使凝胶具有很强的吸水性，同时也含有乙酰胆碱酶，可直接用于有机磷和氨基甲酸酯类农药含量的检测；另外，凝胶作为酶的载体，便于保存在冷藏箱中，进而保证酶活性，从而提高检测的准确率。

技术领域

本发明涉及一种用于检测有机磷和氨基甲酸酯类农药含量的凝胶及其应用，属于农产品安全检测技术领域。

背景技术

近年来，食品安全问题已经严重威胁着人类的健康，而果蔬中由于过量使用或滥用农药而导致的农药残留及其急慢性中毒已经引起了社会的高度重视。目前，快速检测果蔬中有机磷和氨基甲酸酯类农药的残留量是否超标主要2种方法：

1、速测卡法，包括红色药片(含靛酚乙酸酯)和白色药片(含胆碱酯酶)，首先在白色药片(含胆碱酯酶)上滴加待检测溶液，10min后将白色药片与红色药片叠合在一起，3min后观察白色药片的颜色变化；若农药残留量超标，则白色药片为橙红色(被红色药片浸染的颜色)，若农药残留量未超标，则白色药片变为蓝色。该方法操作简单且直观，但是其结果受卡片的酶活性的影响，检测结果准确率较低。

2、酶抑制率法，包括农药残留快速检测仪，首先将配好的试剂粉末加蒸馏水配成缓冲液、显色剂、底物溶液和酶溶液(10min)，然后用缓冲液提取果蔬样品中的农药残留物(3min)，再将酶溶液、显色剂和提取农药残留物的缓冲液混合(15min)，最后加入底物溶液混合后，放入农药残留快速检测仪中的比色池中测出抑制率(3min)，进而通过抑制率判断是否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药。该检测方法操作复杂，且时间周期长(至少需要30min)。

发明内容

本发明的目的在于提供一种可用于检测有机磷和氨基甲酸酯类农药含量的酶凝胶及其制备方法。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

一种用于检测有机磷和氨基甲酸酯类农药含量的凝胶，包括如下组分及体积份：质量浓度为2％的聚乙烯醇90～110份、壳聚糖乙酸溶液90～110份、质量浓度为37％的甲醛2份、酶活力为0.2U/ml的胆碱酯酶溶液8～20份，其中，所述壳聚糖乙酸溶液是通过将质量份1份壳聚糖完全溶于体积份50份质量浓度为1％的乙酸溶液中制备而成。

进一步地，所述凝胶包括如下组分及体积份：质量浓度为2％的聚乙烯醇100份、壳聚糖乙酸溶液100份、质量浓度为37％的甲醛2份、酶活力为0.2U/ml的胆碱酯酶溶液10份。

进一步地，所述胆碱酯酶溶液采用乙酰胆碱酯酶溶液。

一种制备用于检测有机磷和氨基甲酸酯类农药含量的凝胶的方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)原料选取及准备：选取聚乙烯醇溶液、壳聚糖乙酸溶液、质量浓度为37％的甲醛溶液和酶活力为0.2U/ml的胆碱酯酶溶液，所述聚乙烯醇溶液是通过将质量份1份聚乙烯醇1788完全溶于质量份50份去离子水中制备而成，所述壳聚糖乙酸溶液是通过将质量份1份壳聚糖完全溶于体积份50份质量浓度为1％的乙酸溶液中制备而成；

(2)将体积比为1:1的聚乙烯醇溶液和壳聚糖乙酸溶液混合后取体积份180～220份，静置消泡或超声波消泡；加入体积份2份甲醛溶液，搅拌均匀后，温度50℃恒温水浴0.5h制备成透明无色的凝胶晶体；

(3)在透明无色的凝胶晶体冷却后加入体积份8～20份乙酰胆碱酶溶液，待溶液全部被凝胶吸收，即制得酶凝胶。

本发明的另一目的在于提供一种应用凝胶检测有机磷和氨基甲酸酯类农药含量的方法，该方法使用凝胶作为胆碱酯酶的载体。