[发明专利]一种兔心肌梗死动物模型的构建方法

说明书

本发明具体涉及一种兔心肌梗死模型的构建方法。该方法首先使用指引导管从颈动脉进入主动脉根部的窦底，再将微导丝连同微导管送入指引导管的头端。在X线造影的指引下，调整指引导管及微导丝，将微导丝头端送入靶冠状动脉的远段。沿微导丝将微导管送入靶冠脉动脉的所需要到达部位(近段、中段或远段)。撤出微导丝，沿微导管向冠状动脉中注入混有明胶海绵栓塞剂、或微小的自身组织、或小血块的造影剂，或微小的弹簧圈，使靶冠状动脉闭塞，从而成功构建心肌梗死模型。本发明提供了一种全新的非开胸、微创、易行实用的兔心肌梗死模型制备方法，避免开胸操作，避免心包粘连，减少死亡。微创法对动物的损伤小，更有利于冠心病等心脏领域科学研究。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体地说，涉及一种兔心肌梗死模型的构建方法。

背景技术

冠心病是严重危害人类健康的常见疾病。急性心肌梗死作为冠心病中最严重的临床类型，是造成冠心病患者死亡的主要原因。虽然近年来随着介入治疗、冠状动脉旁路移植手术等在临床的应用，急性心肌梗死的急性期病死率有了一定程度的下降，但最终死于心力衰竭等远期死亡率并未下降。

在20世纪50-80年代，治疗心力衰竭主要使用药物来纠正其血流动力学的异常；而至90年代，阻断神经激素、阻断心肌重构的恶性循环已成为心力衰竭治疗的关键，但是心肌梗死所并发的心力衰竭，是由于梗死后所产生的疤痕组织无舒缩功能所致，应用药物仅能阻断心肌重塑的恶性循环，不能从根本上解决问题。故此，如何促进梗死区内心肌细胞再生，提高心肌细胞数目，防止心室重构，已成为防止梗死后心力衰竭发生及降低心肌梗死后远期死亡率的关键。许多科研工作者长期以来一直从事于研究心肌梗死的方法，包括药物治疗、溶栓、冠脉搭桥术、基因治疗以及现在的干细胞组织工程。然而所有这些方法，在应用于临床实验之前都必须先经动物实验证实，而良好动物模型的制作是决定这些实验能否顺利进行以及能否获得可靠结果的前提和基础。目前应用的制作心肌梗死动物模型的方法所制作的动物模型死亡率高，大大影响动物实验的顺利进行和影响实验结果的真实可靠。目前最常用的建立方法是通过左侧胸腔开胸手术永久结扎冠状动脉实现，这种方法能在直视下精确定位，简单、可靠，但是开胸手术会导致大小动物的高死亡率及其它与生理及临床并无关联的不良后果。

中国专利文献CN1472714A公开了一种制作心肌梗死动物模型的方法，包括以下几个步骤：(1)麻醉动物、(2)测心电图、(3)切开胸腔，暴露心脏、(4)用电凝烧灼法阻塞冠状动脉、(5)缝合胸腔、(6)术后护理，该方法动物模型制作时间短，能真实模拟心肌梗死自然发生过程，但开胸后创伤大，操作复杂，容易肺部损伤，易出现大出血、血气胸、呼吸衰竭、缺氧，因此容易死亡。由于开胸手术，术后心包等感染，会造成胸腔粘连，如需第二次开胸做相关研究，如注射干细胞等，手术时会因胸腔粘连而操作困难，后续实验步骤难以完成，动物更容易死亡。中国专利文献CN106806035A公开了一种建立心肌梗死模型的方法，该方法应用一根带线的细针以一种特殊的方式行小鼠胸腔穿刺，并在穿刺后以特殊的打结方法结扎冠状动脉，所有的操作均在超声引导下进行。该方法除了要求术者掌握心脏的解剖结构以及冠状动脉的走向外，还要求具备熟练而精湛的手术操作能力，难度较大，而且动脉结扎过程历时长，易出血，影响实验成功率。因此针对现有技术的缺点，有必要研发一种避免开胸、微创且简单易行的心肌梗死动物模型的制备方法。而关于本发明的兔心肌梗死动物模型的构建方法，目前还未见报道。

发明内容

本发明的目的是，针对现有技术中的不足，提供一种兔心肌梗死模型的构建方法。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案是：

一种兔心肌梗死模型的构建方法，所述的方法包括以下步骤：

(1)将麻醉后的兔固定，动物四肢与心电图仪和带有心电图软件的电脑相连，使动物的心电图可输入电脑；

(2)分离出左或右颈动脉，采用Seldinger技术穿刺颈动脉，将血管鞘送入颈动脉并固定，从血管鞘注射肝素；