[发明专利]一种小球藻-不动杆菌联合去除养殖废水氮、磷的方法

权利要求书

1.一种小球藻-不动杆菌联合去除养殖废水氮、磷的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)初步培养物的获得：取10-20L养殖废水，经粗滤、离心去除悬浮物和大型浮游生物，再抽滤得到滤液，再从滤膜上收集沉淀物，转移到M0液体培养基，全天光照、25℃下培养2～3天，摇床转速100rpm，得到小球藻-不动杆菌初步培养物；

(2)小球藻的分离、培养与强化：取所述小球藻-不动杆菌初步培养物，稀释后5000rpm离心，所得沉淀接种于M0固体培养基，分离、转接，得到小球藻藻株；将所述小球藻藻株接种于M1液体强化培养基，全天光照、25℃下摇床转速150rpm培养2～3天后，转接至新的M1液体强化培养基培养，如此重复培养2周，得到强化后的小球藻；

(3)伴生不动杆菌的获得：取所述小球藻-不动杆菌初步培养物，5000rpm离心后加入M2液体培养基，继续25℃、非光照条件下扩大培养3～4天后，5000rpm离心去掉上清液，更换等体积的新鲜M1液体强化培养基，得到不动杆菌的初步培养物；定期测定培养液中磷的含量，当磷去除率达到60％以上时，取培养液5000rpm离心，所得沉淀物转入M0固体培养基中培养、分离，得到小球藻伴生的不动杆菌；

(4)将步骤(2)强化后的小球藻和步骤(3)所得不动杆菌混合，放入养殖废水中使其自然生长3～7天，即可完成对养殖废水中氮、磷的去除；

其中，每升所述M0液体培养基包括如下组分：NaNO₃ 1500mg，K₂HPO₄ 0.04mg，MgSO₄·7H₂O 75mg，CaCl₂·2H₂O 36mg，柠檬酸6mg，EDTA 1mg，Na₂CO₃ 20mg；

每升所述M0固体培养基包括如下组分：NaNO₃ 1500mg，K₂HPO₄ 0.04mg，MgSO₄· 7H₂O75mg，CaCl₂· 2H₂O 36mg，柠檬酸6mg，EDTA 1mg，Na₂CO₃ 20mg，琼脂粉2wt％；

每升所述M1液体强化培养基包括如下组分：NaNO₃ 2000mg，K₂HPO₄ 0.05mg，柠檬酸6mg；

每升所述M2液体培养基包括如下组分：CH₃COONa 4g，Na₂HPO₄ 30mg，NH₄Cl 60mg，CaCl₂·2H₂O 17.2mg，pH为7.0；

步骤(4)中，所述强化后的小球藻和所述不动杆菌的体积比为100～200:1，混合后的小球藻-不动杆菌的接种体积与养殖废水的体积比为1:500～1000。

2.根据权利要求1所述的小球藻-不动杆菌联合去除养殖废水氮、磷的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述小球藻藻株通过购买获得；当购买获得小球藻藻株时，在进行步骤(1)之前，先将所述购买的小球藻藻株投入养殖废水中，然后进行后续步骤。