[发明专利]一种鼠李糖乳杆菌复合剂及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及微生物复合制剂领域，提供一种鼠李糖乳杆菌复合剂，制备原料包括鼠李糖乳杆菌85～90份和蛋白酶解多肽0.6～13.5份；蛋白酶解多肽的重量以干重计；鼠李糖乳杆菌复合剂中所含活菌数在10¹⁰cfu/g以上；所述蛋白酶解多肽中多肽的质量含量在75％以上、所述蛋白酶解多肽中相对分子量1000Da以下的多肽的质量占比不低于80％，所述蛋白酶解多肽中天冬氨酸的质量百分数在1％以上，谷氨酸质量分数在5％以上。本发明研究表明，鼠李糖乳杆菌和蛋白酶解多肽复配后，能够显著提高鼠李糖乳杆菌的抗过敏以及提高免疫力作用。在制备过程中，蛋白酶解多肽还能够起到促进鼠李糖乳杆菌增殖以缩短发酵时间的作用以及冻干保护作用。

技术领域

本发明涉及微生物复合制剂领域，具体涉及一种鼠李糖乳杆菌复合剂及其制备方法和应用。

背景技术

鼠李糖乳杆菌是由两位来自美国的科学家在上世纪80年代分离自健康人体肠道的一种兼性厌氧性菌株，可生长温度30-40℃，可生长pH范围为5.3-8.0，生长时所需的营养要求比较苛刻，较为复杂。

鼠李糖乳杆菌耐肠道酸性环境的能力较强，具有较强的定植及粘附能力，能在肠道内存活较长时间，可抑制肠道内革兰氏阴性菌的生长繁殖，有效调整肠道菌群结构，改善肠道屏障功能，提高机体抗氧化水平，刺激机体免疫系统，提高机体免疫力。

然而鼠李糖乳杆菌生长时要求的营养较为复杂，除了基本的营养外，还需要无机元素、氨基酸及生长因子等的刺激。如何得到生产工艺简单、生产成本低、活菌数高、品质稳定且保存期长的鼠李糖乳杆菌菌粉成为一大难题。

发明内容

本发明为了解决现有技术中鼠李糖乳杆菌制剂活菌数不够高、稳定性不足以及增强免疫等益生效果不显著的问题，提供了一种鼠李糖乳杆菌复合剂，其中的鼠李糖乳杆菌与蛋白酶解多肽存在协同作用，能够显著提高鼠李糖乳杆菌的益生效果。

为了解决上述问题，本发明提供了以下技术方案：

本发明提供了一种鼠李糖乳杆菌复合剂，制备原料包括以下重量份的组分：鼠李糖乳杆菌85～90份和蛋白酶解多肽0.6～13.5份；所述蛋白酶解多肽的重量以干重计；

所述鼠李糖乳杆菌复合剂中所含活菌数在10¹⁰cfu/g以上；

所述蛋白酶解多肽中多肽的质量含量在75％以上、所述蛋白酶解多肽中相对分子量1000Da以下的多肽的质量占比不低于80％，所述蛋白酶解多肽中天冬氨酸的质量百分数在1％以上，谷氨酸质量分数在5％以上。

优选的，所述蛋白酶解多肽选自蛋白酶解液或蛋白酶解多肽干粉。

优选的，所述蛋白酶解多肽选自碱性蛋白酶、中性蛋白酶和胰蛋白酶中一种或多种酶解蛋白的产物。

优选的，所述用于制备蛋白酶解多肽的蛋白选自鸡蛋清、乳清蛋白粉、大豆、豌豆、玉米和大米中的一种或多种。

本发明还提供了一种上述技术方案所述鼠李糖乳杆菌复合剂的制备方法，包括以下步骤：

(1)将鼠李糖乳杆菌接种至种子培养基中活化，得到一级种子液；

(2)将所述一级种子液接种至种子培养基中厌氧培养8～20h，得到二级种子液；

(3)将所述二级种子液接入含有蛋白酶解多肽的发酵培养基中进行高密度发酵，离心取沉淀，得到菌泥；

(4)将所述菌泥与冻干保护剂混合后进行乳化包埋，得到乳化液；

按质量百分比计，所述冻干保护剂包括5～10％脱脂乳粉、1～3％海藻糖、2～8％糊精和5～20％蛋白酶解多肽和其余量的水；

(5)将得到的乳化液冷冻干燥，粉碎，得到鼠李糖乳杆菌复合剂。