[发明专利]一种生产、分离以及纯化藻多糖的工艺

权利要求书

1.一种生产、分离以及纯化藻多糖的工艺，其特征在于，所述工艺包括如下步骤：

步骤1）小球藻前培养：将处于对数生长期的普通小球藻液，按照5-7％的接种量接种到含有培养液的反应池中；

步骤2）小球藻后培养：培养72h小时后，添加葡萄糖和花生四烯酸，继续培养48-72h，将培养液进行离心收集藻泥；

步骤3）分离粗藻多糖：取藻泥，干燥，粉碎；取藻粉，然后添加10倍重量的水作为提取液，超声波破壁，然后加热至80℃，保温条件下水提4h，提取后离心，去除沉沉物，收集上清；絮凝沉淀蛋白，离心收集上清液，减压蒸发至原体积的三分之一，然后添加3倍体积的95％乙醇，4000rpm离心20min，得到沉淀部分，进行干燥，得到粗藻多糖；

步骤4）纯化：采用DEAE-cellulose 52纤维素柱层析对粗藻多糖进行分离纯化，经收集、减压浓缩、透析和冷冻干燥，得到藻多糖产品。

2.根据权利要求1所述的工艺，其特征在于，所述培养液的组分为：葡萄糖5g/L，硝酸钾2g/L，氯化钠1g/L，硼砂0.5g/L，磷酸二氢钾0.5g/L，碳酸钙0.1g/L，七水硫酸镁50mg/L，柠檬酸铁铵20mg/L，萘乙酸钠10mg/L，赤霉素10mg/L。

3.根据权利要求1所述的工艺，其特征在于，所述步骤2）中，通过添加葡萄糖，使培养液中的葡萄糖浓度为3-5g/L。

4.根据权利要求1所述的工艺，其特征在于，所述步骤2）中，通过添加花生四烯酸，使培养液中花生四烯酸浓度为100-200mg/L。

5.根据权利要求1所述的工艺，其特征在于，所述超声波的条件为：超声波脉冲为9.9s，间隔为3.3s，超声波功率为450W，超声波作用时间为30min。

6.根据权利要求1所述的工艺，其特征在于，所述前培养和后培养的条件均为：光照强度5000-6000lux，22-25℃培养，光暗比为18:6。