[发明专利]突变的核酸外切酶及其编码基因与应用有效
申请号: | 201810977873.6 | 申请日: | 2018-08-27 |
公开(公告)号: | CN109055332B | 公开(公告)日: | 2020-11-27 |
发明(设计)人: | 李卓;单大鹏;卢淑红;张雪松;陈凯英;解兵斌;陈孜孟;申玉龙;周礼芹 | 申请(专利权)人: | 国家海洋局第三海洋研究所 |
主分类号: | C12N9/22 | 分类号: | C12N9/22;C12N15/56;C12N15/70;C12N1/21;C12N15/10;C12R1/19 |
代理公司: | 北京惟诚致远知识产权代理事务所(普通合伙) 11536 | 代理人: | 李巍 |
地址: | 361005 福*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 突变 核酸外切酶 及其 编码 基因 应用 | ||
1.一种突变的核酸外切酶,其氨基酸序列为序列表中序列1所示。
2.一种编码突变的核酸外切酶的基因,其核苷酸序列为序列表中序列2所示。
3.一种重组表达载体,其多克隆位点上插入有权利要求2所述的编码突变的核酸外切酶的基因。
4.一种重组菌,其含有权利要求3所述的重组表达载体。
5.根据权利要求4所述的重组菌,其特征在于所述重组菌为大肠杆菌。
6.权利要求1所述的突变的核酸外切酶在PCR反应中的应用。
7.一种获得目的基因的方法,其包括如下步骤:
根据目的基因的序列设计引物,
以含有所述目的基因的DNA片段或基因组DNA为模板,利用所设计的引物和权利要求1所述的突变的核酸外切酶进行PCR,
分离PCR产物获得所述目的基因。
8.一种PCR反应试剂盒,其包括权利要求1所述的突变的核酸外切酶。
9.根据权利要求8所述的PCR反应试剂盒,其特征在于所述试剂盒还包括PCR的缓冲液,所述PCR的缓冲液由以下组成:0.2mM dNTP、2mM MgCl2、10mM(NH4)2SO4、20mM KCl和25mMTris pH8.5。
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