[发明专利]一种鉴别南瓜亲缘关系远近的方法在审
| 申请号： | 201810980212.9 | 申请日： | 2018-08-27 |
| 公开（公告）号： | CN109142497A | 公开（公告）日： | 2019-01-04 |
| 发明（设计）人： | 何丽烂;任吉君;王惠珍;区炳庆 | 申请（专利权）人： | 佛山科学技术学院 |
| 主分类号： | G01N27/447 | 分类号： | G01N27/447 |
| 代理公司： | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人： | 王国标 |
| 地址： | 528000 广东省佛山市*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 南瓜 亲缘关系 图谱 产地 电泳 鉴别 电泳图谱 两相 酶带 相异 聚类分析 迁移率 构建 直观 检测 生长 | ||
1.一种鉴别南瓜亲缘关系远近的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)构建各已知产地南瓜的酶电泳总图谱；
(2)以与步骤(1)相同的方法建立待测南瓜的酶电泳图谱；
(3)将步骤(2)所述的酶电泳图谱与步骤(1)所述的酶电泳总图谱进行聚类分析，计算图谱相异系数C；
所述酶为多酚氧化酶；所述图谱的迁移率Rf为0.3～0.8。
2.根据权利要求1所述鉴别南瓜亲缘关系远近的方法，其特征在于，步骤(1)所述构建各已知产地南瓜的酶电泳总图谱的方法包括：
(A)取南瓜组织1g，加入浓度为0.05mol/L的磷酸缓冲液3mL，于预冷研钵中匀浆后离心，取上清液，加入甘油后摇匀，得酶电泳液并低温保存；
(B)采用凝胶电泳系统，对步骤(A)所述酶电泳液进行电泳；
(C)根据步骤(B)的结果绘制模式图并计算条带数。
3.根据权利要求2所述鉴别南瓜亲缘关系远近的方法，其特征在于，步骤(A)所述南瓜组织包括南瓜根、茎、叶、果实和种子中的一种。
4.根据权利要求2所述鉴别南瓜亲缘关系远近的方法，其特征在于，步骤(A)所述磷酸缓冲液的pH为6.5～7.5。
5.根据权利要求2所述鉴别南瓜亲缘关系远近的方法，其特征在于，步骤(A)所述甘油的添加量为15～25(wt)％。
6.根据权利要求2所述鉴别南瓜亲缘关系远近的方法，其特征在于，步骤(A)所述低温保存的温度为-15～-25℃。
7.根据权利要求2所述鉴别南瓜亲缘关系远近的方法，其特征在于，步骤(B)所述凝胶电泳系统为不连续丙烯酰胺凝胶电泳系统。
8.根据权利要求2所述鉴别南瓜亲缘关系远近的方法，其特征在于，步骤(B)所述电泳为稳流电泳，浓缩胶电流为1mA，分离胶电流为2mA。
9.根据权利要求2所述鉴别南瓜亲缘关系远近的方法，其特征在于，步骤(B)所述电泳的时间为4h，电泳的温度为4～6℃。
10.根据权利要求1所述鉴别南瓜亲缘关系远近的方法，其特征在于，所述相异系数C＝2w/(a+b)，w表示步骤(2)所述的待测南瓜与步骤(1)中的已知产地南瓜中的一种两相比较类型不同的酶带数，a+b表示两相比较各自类型的酶带总数。
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