[发明专利]一种新城疫病毒/全悬浮CHOK1细胞株及其制法和采用该细胞株制备的抗原及疫苗有效
申请号: | 201810980429.X | 申请日: | 2018-08-27 |
公开(公告)号: | CN110862956B | 公开(公告)日: | 2021-08-17 |
发明(设计)人: | 侯野;李燕;王璐;韩丹;宋春雨;邵瑞华;刘少奇;李俊锋;李凤友 | 申请(专利权)人: | 北京鼎持生物技术有限公司;辽宁鼎持生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071;C12N7/00;A61K39/17;A61P31/14 |
代理公司: | 北京方安思达知识产权代理有限公司 11472 | 代理人: | 陈琳琳;张红生 |
地址: | 100176 北京市通州*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 新城 疫病 悬浮 chok1 细胞株 及其 制法 采用 制备 抗原 疫苗 | ||
1.一种新城疫病毒抗原的制备方法,所述制备方法包括以下步骤:
1)复苏新城疫病毒/全悬浮CHOK1细胞株,并采用悬浮细胞培养瓶逐级放大,将细胞扩增,待细胞生长至浓度为不低于6×106cells/mL后,全部转移至生物反应器中,培养并采样进行细胞计数和活力检测;
2)接毒和收毒
当生物反应器中活细胞密度不低于2.5×106 细胞 /mL,按细胞培养液体积的1%-5%比例接入新城疫病毒,于接毒后24h起,每隔一时间段采样进行细胞计数,当活细胞密度低于0.5×106后,收获病毒液即为新城疫病毒抗原,效价HA滴度达10-12 log2/100µL;
所述新城疫病毒/全悬浮CHOK1细胞株为CHOK1-DC005细胞株,保藏号为CGMCC No.16211。
2.根据权利要求1所述的一种新城疫病毒抗原的制备方法,其特征在于,所述新城疫病毒的病毒株为新城疫病毒Ⅰ系疫苗株、新城疫病毒Ⅱ系疫苗株、新城疫病毒Ⅲ系疫苗株、新城疫病毒Ⅳ系疫苗株、新城疫病毒克隆-30疫苗株或新城疫病毒基因Ⅶ型疫苗株。
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