[发明专利]一种庆大霉素C1a的纯化方法

权利要求书

1.一种庆大霉素C1a的纯化方法，其特征在于，其包括下述步骤：

(1)将pH调整为10.0-12.0的庆大霉素发酵液经大孔吸附树脂层析，得层析液A1；将pH调整为6.0-8.0的层析液A1经大孔弱酸性阳离子树脂层析，得层析液A2；所述大孔吸附树脂层析的流动相为pH 1.0-2.0的酸水溶液，所述大孔弱酸性阳离子树脂层析的流动相为pH11.0-12.0的氨水溶液；

或者，将pH调整为6.0-8.0的庆大霉素发酵液经大孔弱酸性阳离子树脂层析，得层析液B1；将pH调整为10.0-12.0的层析液B1经大孔吸附树脂层析，得层析液B2；所述大孔弱酸性阳离子树脂层析的流动相为pH 11.0-12.0的氨水溶液，所述大孔吸附树脂层析的流动相为pH 1.0-2.0的酸水溶液；

(2)将步骤(1)中所述层析液A2或所述层析液B2的pH调至10.0-12.0，经反相吸附树脂层析，得层析液C，将所述层析液C的pH调至4.0-8.0，即可；所述反相吸附树脂层析的流动相为pH 1.0-2.0的酸水溶液，所述反相吸附树脂为聚苯乙烯二乙烯基苯系树脂。

2.如权利要求1所述的庆大霉素C1a的纯化方法，其特征在于，

步骤(1)中，所述大孔吸附树脂的种类为DM11树脂、LX1500树脂、HZ-816树脂、HZ-803树脂、HZ-814树脂和HZ-804树脂中的一种或多种，优选为DM11树脂、LX1500树脂、HZ-816树脂、HZ-803树脂或HZ-804树脂；

和/或，步骤(1)中，所述大孔吸附树脂层析的方式为柱层析，其中，柱体积优选为2.7-3L，高径比优选为3：1；

和/或，步骤(1)中，在所述pH调整为10.0-12.0的庆大霉素发酵液或所述pH调整为10.0-12.0的层析液B1经大孔吸附树脂层析前，经水和/或pH 2-5的酸水溶液洗脱除杂；所述水的洗脱体积优选为3-5BV；所述水的洗脱流速优选为0.2-1BV/h；所述pH 2.0-5.0的酸水溶液的洗脱流速优选为0.5-1BV/h；所述pH 2.0-5.0的酸水溶液的pH优选为2.5、3.0或4.0；所述pH 2.0-5.0的酸水溶液的酸优选为硫酸和/或乙酸；所述pH 3.0-5.0的酸水溶液优选为pH 2.5的硫酸溶液、pH 3.0的硫酸溶液、pH 4.0的硫酸溶液、pH 2.5的乙酸溶液或pH3.0的乙酸溶液。

3.如权利要求1所述的庆大霉素C1a的纯化方法，其特征在于，步骤(1)中，将pH调整为11.0-12.0的庆大霉素发酵液经大孔吸附树脂层析，优选为pH调整为11的庆大霉素发酵液或pH调整为12的庆大霉素发酵液；

和/或，步骤(1)中，将pH调整为11.0-12.0的层析液B1经大孔吸附树脂层析，优选为pH调整为11的层析液B1或pH调整为12的层析液B1；

和/或，步骤(1)中，所述pH 1.0-2.0酸水溶液的pH为1.0、1.5或2.0；

和/或，步骤(1)中，所述pH 1.0-2.0酸水溶液的酸为硫酸和/或乙酸；优选地，所述pH1.0-2.0酸水溶液为pH 1.0的硫酸水溶液、pH 1.5的硫酸水溶液、pH 2.0的硫酸水溶液、pH1.0的乙酸水溶液或pH 1.5的乙酸水溶液；

和/或，步骤(1)中，所述pH 1-2的酸水溶液的流速为0.5-1BV/h；

和/或，步骤(1)中，将pH调整为7.0-8.0的庆大霉素发酵液经大孔弱酸性阳离子树脂层析；

和/或，步骤(1)中，将pH调整为7.0-8.0的层析液A1经大孔弱酸性阳离子树脂层析；

和/或，步骤(1)中，所述pH 11.0-12.0的氨水溶液为pH 11.0的氨水溶液或pH 12.0的氨水溶液；

和/或，步骤(1)中，所述pH 11.0-12.0的氨水溶液的流速为0.5-1BV/h。